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frank7709

新虫 (正式写手)

[交流] pcr引物5‘端引入多长不相关的序列?

pcr引物5‘端可以最多引入多长和基因不相关的序列?

[ Last edited by amisking on 2009-6-12 at 07:59 ]
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三磷酸腺苷

铁杆木虫 (职业作家)

主要看你匹配部分会有多少,以及不匹配部分的2级结构
极端的话,像茎环引物,跟模板匹配就7个nt
而非匹配部分有三十几个nt
但是非匹配部分形成一个茎环结构
如此在热动力学上不容易从模板上掉下来
7楼2009-06-12 09:47:41
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lifeip

至尊木虫 (知名作家)


frank7709(金币+1):谢谢参与
可以长达几十bp,如做重叠引物延伸PCR法做突变引物,但常规以2~5bp为合适。
2楼2009-06-12 02:18:36
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michaelwuqingyu

金虫 (正式写手)


frank7709(金币+1):谢谢参与
我一般就加12个左右,如果作正常酶切的话,6个酶切位点 6个保护碱基。但和基因匹配的地方不能太短 最少 18
3楼2009-06-12 06:03:48
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dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)

我引入9个,没问题
4楼2009-06-12 07:00:47
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