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frank7709

新虫 (正式写手)

[交流] pcr引物5‘端引入多长不相关的序列?

pcr引物5‘端可以最多引入多长和基因不相关的序列?

[ Last edited by amisking on 2009-6-12 at 07:59 ]
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andy03802

金虫 (小有名气)

我引入30个没问题,我感觉可以这么做,先用不含你需要引入的片段来扩,TA测序正确后,再用此质粒作为模板扩,引物换成有你需要引人的引物,这样可能更好扩,不过浪费时间
10楼2009-06-13 16:13:24
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lifeip

至尊木虫 (知名作家)


frank7709(金币+1):谢谢参与
可以长达几十bp,如做重叠引物延伸PCR法做突变引物,但常规以2~5bp为合适。
2楼2009-06-12 02:18:36
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michaelwuqingyu

金虫 (正式写手)


frank7709(金币+1):谢谢参与
我一般就加12个左右,如果作正常酶切的话,6个酶切位点 6个保护碱基。但和基因匹配的地方不能太短 最少 18
3楼2009-06-12 06:03:48
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dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)

我引入9个,没问题
4楼2009-06-12 07:00:47
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