24小时热门版块排行榜    

查看: 1875  |  回复: 6

寥落星晨

木虫 (小有名气)

[交流] 双酶切跑胶后用凝胶回收试剂盒回收效率低

求助各位老师,我最近对质粒双酶切,测定3600bp大小的质粒,提取的质粒浓度为328ng/ul,取10ul进行酶切实验,酶切20ul体系,全部跑胶回收807bp目的片段的时候,用10ul洗脱,浓度却仅有25ng/ul左右,感觉很不正常啊,请问这还能继续进行连接实验吗?有没有好的办法提高回收率啊?麻烦您能不能给我一些意见

发自小木虫IOS客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
寥落星晨: 金币+10 2019-12-14 21:13:28
双酶切回收,回收率一般10%,建议你切个20ug回收

发自小木虫Android客户端
2楼2019-12-14 20:47:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

雨独步

铁杆木虫 (著名写手)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
寥落星晨: 金币+10 2019-12-14 21:15:38
一般酶切产物回收后浓度只有十几ng/ul,连接时载体按30ng加,基因片段mol数是载体的3-10倍,回收后的基因片段25ng/ul我觉得足够做连接了。
3楼2019-12-14 20:58:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

寥落星晨

木虫 (小有名气)

谢谢,这要弄缩dna吗?用真空干燥浓缩吗

发自小木虫IOS客户端
4楼2019-12-14 21:14:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1772701

新虫 (初入文坛)

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
寥落星晨: 金币+10 2019-12-15 07:37:19
如果想要胶回收浓度再高点可以尝试做40ul体系,酶切时间长点(在允许范围内),胶回收浓度普遍较低,25ng/ul的浓度其实还好
5楼2019-12-15 00:53:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘小小香

新虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
可以直接做连接,没问题的

发自小木虫Android客户端
6楼2019-12-19 07:55:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Acov

新虫 (小有名气)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-12-21 21:24:33
有个办法就是,酶切100ul体系,然后直接试剂盒纯化回收后,再跑胶回收,这样浓度会比较高

发自小木虫Android客户端
7楼2019-12-19 08:37:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 寥落星晨 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 264求调剂 +5 26调剂 2026-03-03 5/250 2026-03-03 17:28 by barlinike
[考研] 求调剂 +4 Guo_yuxuan 2026-03-02 5/250 2026-03-03 14:39 by xiaomc_gzh
[考研] 计算机学硕 分数285求调剂 +4 glwshine 2026-03-02 5/250 2026-03-03 14:27 by king呀
[考研] 化学0703求调剂 学硕 理/工科均可 总分279 +3 1一11 2026-03-03 5/250 2026-03-03 12:37 by 1一11
[考研] 26考研报考西工大材料308分求调剂 +4 weizhong123 2026-03-01 5/250 2026-03-03 12:22 by weizhong123
[考研] 281电子信息求调剂 +3 jhtfeybgj 2026-03-02 6/300 2026-03-03 12:12 by 热情沙漠
[考研] 0857调剂 +6 一ll半 2026-02-28 8/400 2026-03-03 09:30 by 热情沙漠
[考研] 307求调剂 +6 wyyyqx 2026-03-01 6/300 2026-03-03 09:24 by 2235787770
[考研] 271求调剂 +4 Ricardo1113 2026-03-02 4/200 2026-03-03 08:00 by 无际的草原
[考研] 338求调剂 +5 18162027187 2026-03-02 6/300 2026-03-03 07:52 by njzyff
[考研] 282求调剂 +4 2103240126 2026-03-02 7/350 2026-03-02 23:02 by 2103240126
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +5 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 9/450 2026-03-02 21:33 by sunny81
[考研] 0856材料求调剂 +12 hyf hyf hyf 2026-02-28 13/650 2026-03-02 20:19 by hypershenger
[考研] 0854总分272 +3 打小就是老实人 2026-03-02 4/200 2026-03-02 19:49 by 求调剂zz
[考研] 一志愿郑大材料学硕298分,求调剂 +6 wsl111 2026-03-01 6/300 2026-03-02 11:00 by ydudjddnd
[考研] 材料调剂 +6 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 7/350 2026-03-02 10:42 by Jy?
[考研] 291分工科求调剂 +9 science饿饿 2026-03-01 10/500 2026-03-01 18:55 by 18137688336
[考研] 328求调剂 +3 aaadim 2026-03-01 5/250 2026-03-01 17:29 by njzyff
[考研] 0856材料求调剂 +4 麻辣鱿鱼 2026-02-28 4/200 2026-03-01 16:51 by caszguilin
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
信息提示
请填处理意见