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双交换问题
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xydlengyue
金虫
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虫号: 6970639
[交流]
双交换问题
最近在做pre112自杀质粒大肠杆菌基因敲除 单交换已经做出来了 pcr2条带 大小也对 现在在10%蔗糖作用下双交换筛选 已经培养了7代了 大概有50%几率出现疑似阳性菌 挑了几十个疑似阳性菌pcr验证结果全是野生型,求大佬指点一下怎么破 就只能一个个筛选 靠工作量选吗 有什么技巧吗 有点难受啊
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1楼
2019-12-06 00:53:52
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喵咪在哪
新虫
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虫号: 14360876
要不提高下蔗糖浓度,我们实验室用的都是20%蔗糖。
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17楼
2020-06-24 15:57:52
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liuqiang68
至尊木虫
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5楼
2019-12-06 06:20:00
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biosci
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xydlengyue(金币+1): 谢谢参与
做大肠敲除,不用Red系统和CRISPR系统,用SacB系统,效率很低
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9楼
2019-12-06 08:43:51
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xydlengyue
金虫
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虫号: 6970639
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9楼
:
Originally posted by
biosci
at 2019-12-06 08:43:51
做大肠敲除,不用Red系统和CRISPR系统,用SacB系统,效率很低
但是已经到了最后一步了..
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10楼
2019-12-06 09:00:56
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hikingman
8楼
2019-12-06 08:13
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xiaoshuang1
6楼
2019-12-06 07:58
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xydlengyue(金币+1): 谢谢参与
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solarzhao
7楼
2019-12-06 08:03
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xydlengyue(金币+1): 谢谢参与
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nono2009
3楼
2019-12-06 02:51
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xydlengyue(金币+1): 谢谢参与
。
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