应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助！！qPCR绝对定量，可以用提取的细菌基因组DNA作为标准品么？
71/1返回列表
查看: 3796  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

webbzc

新虫 (初入文坛)

[求助] 求助！！qPCR绝对定量，可以用提取的细菌基因组DNA作为标准品么？ 已有1人参与

本人生物小白一枚，最近想用实时荧光定量qPCR对几种细菌DNA进行绝对定量。查到的好多方法都是说，得用目的基因转化的质粒去做标准品，绘制标准曲线。但是本人想直接用提取的细菌基因组DNA（或者用普通PCR产物也就是目的基因）进行定量、倍比稀释作为标准品。但是没有查到相关资料，不知道各位大佬的实验室有没有这样做过，望指教！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2019-12-04 23:11:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

花随人愿

银虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-12-29 22:11:44
用质粒做标准品，因为质粒浓度是可以精准定量的，这样你的绝对定量才有意义。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2019-12-04 23:38:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

webbzc

新虫 (初入文坛)
谢谢，但是最近看到文献中，有直接从标准菌株中提取基因组Dna,定量后倍比稀释作为标准品的。不知道该方法有什么弊端么？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2019-12-08 21:27:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

webbzc

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 花随人愿 at 2019-12-04 23:38:27
用质粒做标准品，因为质粒浓度是可以精准定量的，这样你的绝对定量才有意义。

谢谢您，但是最近看到文献中，有直接从标准菌株中提取基因组Dna,定量后倍比稀释作为标准品的。不知道该方法有什么弊端么？

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2019-12-08 21:27:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

E1nstein

新虫 (初入文坛)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-12-29 22:11:59
可以直接用pcr产物，跑电泳切胶回收目的条带，然后用作标准品，可以一起交流呀

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
5楼2019-12-27 17:35:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhttt333

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2019-12-29 22:12:10
用质粒DNA作标准品， 因为长度，DNA非线性等不同于样品，其qpcr efficency 不同于样品而导致结果偏差， 所以用标化的标准菌株中提取基因组dna 作标准品。
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2019-12-29 06:37:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

tanglianfa

金虫 (著名写手)
同学您好 ，我也是这么想的，方便留下联系方式吗
赞一下 回复此楼
7楼2020-09-03 13:05:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 webbzc 的主题更新
71/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 334求调剂 +7 Trying] 2026-03-06 7/350 2026-03-08 03:55 by lfhuang
[考研] 2026考研求调剂-材料类-本科211一志愿985-初试301分 +4 虫友233 2026-03-07 4/200 2026-03-07 22:56 by Leeding1356
[考研] 求调剂，不管什么专业，我是可塑造的人才一枚，希望遇到知己老师捞捞我 +4 13102137290 2026-03-06 5/250 2026-03-07 21:21 by lissomchan
[考研] 一志愿中国石油大学（华东） 本科齐鲁工业大学 求调剂 +3 snw石 2026-03-07 3/150 2026-03-07 20:01 by houyaoxu
[考研] 材料专硕323求调剂 +5 李白26 2026-03-07 5/250 2026-03-07 16:46 by njzyff
[考研] 278求调剂 +5 Gale1314 2026-03-06 5/250 2026-03-07 14:41 by 2735147993
[考研] 一志愿南京大学资源与环境专业283分求调剂 +8 追云?? 2026-03-04 8/400 2026-03-07 09:23 by 斩魂滴兔子！
[考研] 273求调剂 +5 星星111222 2026-03-02 7/350 2026-03-06 20:17 by 星星111222
[考研] 287求调剂 +3 看看我. 2026-03-05 6/300 2026-03-06 10:40 by Iveryant
[考研] 材料与化工354调剂 +4 Lucy-xiao 2026-03-06 7/350 2026-03-06 09:57 by hxuq8429
[考研] 080500材料科学与工程 +13 202114020319 2026-03-03 13/650 2026-03-06 00:29 by wutongshun
[考研] 328求调剂 +6 vuzhdkfjkx 2026-03-04 7/350 2026-03-05 23:28 by Leeding1356
[考研] 材料调剂 +4 L9370 2026-03-05 4/200 2026-03-05 19:36 by caszguilin
[考研] 调剂材料学硕 +6 词凝Y 2026-03-02 6/300 2026-03-05 07:10 by 昆工985
[考研] 0854总分272 +5 打小就是老实人 2026-03-02 6/300 2026-03-04 01:41 by ouhaiyu
[考研] 化工专硕调剂 +4 利好利好. 2026-03-03 7/350 2026-03-03 21:30 by L135790
[考研] 268求调剂 +6 好运连绵不绝 2026-03-02 6/300 2026-03-03 13:03 by 秋收
[考研] 化工京区271求调剂 +7 11ing 2026-03-02 7/350 2026-03-03 07:30 by 利好利好.
[考研] 0854复试调剂 276 +5 wmm9 2026-03-01 7/350 2026-03-03 02:49 by xiadaiyang
[考研] 261求调剂 +3 陆lh 2026-03-01 3/150 2026-03-02 19:32 by zhukairuo
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭