应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 使用JQ200SK自杀质粒敲除BL21(DE3)基因组基因的问题
41/1返回列表
查看: 1227  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

songxiawu

金虫 (著名写手)

[求助] 使用JQ200SK自杀质粒敲除BL21(DE3)基因组基因的问题 已有1人参与

在进行基因敲除的实验，想采用自杀性质粒pJQ200SK来做基因敲除，宿主细胞是BL21(DE3)，请问在敲除过程中，需要先使用pKD46诱导重组酶么？还是直接把带同源序列的目的基因用pJQ200SK直接转化BL21(DE3)就行？

我看了pJQ200SK的质粒图谱，也没有pKD46上的那些重组酶基因啊。
回复此楼

» 猜你喜欢
努力
1楼 2019-11-25 22:12:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

枕琴听雨笙

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2019-11-26 17:57:00
用自杀质粒敲除的话，直接转化，然后筛选双交换菌株就行

pKD46用于Red重组敲除系统，自杀质粒法则是RecA介导的同源重组，两者原理不同
赞一下 回复此楼
2楼2019-11-26 17:28:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (知名作家)
可以直接用pkd质粒和pcp20质粒进行大肠杆菌基因敲除，最经典的方法。我们经常在做

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2019-11-26 19:41:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

595420185

新虫 (初入文坛)
楼主有BL21（DE3）的基因组吗？可否分享一下？

发自小木虫IOS客户端
赞一下 回复此楼
4楼2020-09-17 18:07:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 songxiawu 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 oko5baaf5j 2026-06-05 6/300 2026-06-07 05:25 by rcch43i39g
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 c8fjyc45my 2026-06-05 3/150 2026-06-07 05:20 by rcch43i39g
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 c8fjyc45my 2026-06-05 4/200 2026-06-07 05:11 by rcch43i39g
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 c8fjyc45my 2026-06-05 4/200 2026-06-07 05:05 by rcch43i39g
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 c8fjyc45my 2026-06-05 6/300 2026-06-07 05:05 by rcch43i39g
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 c8fjyc45my 2026-06-05 6/300 2026-06-07 05:04 by rcch43i39g
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 c8fjyc45my 2026-06-05 5/250 2026-06-07 04:31 by rcch43i39g
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 c8fjyc45my 2026-06-05 6/300 2026-06-07 04:24 by rcch43i39g
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 c8fjyc45my 2026-06-05 7/350 2026-06-07 04:20 by rcch43i39g
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 c8fjyc45my 2026-06-05 4/200 2026-06-07 04:11 by rcch43i39g
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 c8fjyc45my 2026-06-05 3/150 2026-06-07 04:05 by rcch43i39g
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 c8fjyc45my 2026-06-05 4/200 2026-06-07 03:51 by rcch43i39g
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 t7ptwec48b 2026-06-05 6/300 2026-06-07 03:45 by rcch43i39g
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 c8fjyc45my 2026-06-05 6/300 2026-06-07 00:31 by rcch43i39g
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 c8fjyc45my 2026-06-05 6/300 2026-06-07 00:11 by rcch43i39g
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 c8fjyc45my 2026-06-05 3/150 2026-06-06 21:43 by rcch43i39g
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 c8fjyc45my 2026-06-05 4/200 2026-06-06 14:19 by pb2dsewnaf
[论文投稿] 你们遇到过吗 +8 小lee同学 2026-06-02 8/400 2026-06-06 07:56 by 六两废铜
[基金申请] 祈祷自己至少3A2B上会啊！ +7 苏周儒隽 2026-06-02 7/350 2026-06-04 11:49 by jurkat.1640
[基金申请] 山东省优青 青B通知了？？？？ +3 jerry681 2026-06-02 3/150 2026-06-02 15:56 by sdtawz1
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭