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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 重叠PCR成功得到目的长度片段，但是将产物回收后，无法以其为模板扩增
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KM石头

金虫 (正式写手)

[交流] 重叠PCR成功得到目的长度片段，但是将产物回收后，无法以其为模板扩增

如题，使用的酶为takara的高保真酶，拼接的三个片段长度分别为560,3000,560
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1楼2019-11-22 10:19:21
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JAYWEN书生

银虫 (小有名气)
★
KM石头(金币+1): 谢谢参与
试试POE组装法呢？
或者Proofast™ Super-Fidelity DNA Polymerase
还不错，我师姐在Science Advances发的文章就用这个。DOI: 10.1126/sciadv.aaw8451
赞一下 回复此楼
17楼2020-03-11 15:14:51
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三撇五撇

银虫 (小有名气)
★
KM石头(金币+1): 谢谢参与
你确定拼接出全长了？且目的条带清晰可见
赞一下 回复此楼
3楼2019-11-22 13:35:47
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KM石头

金虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 三撇五撇 at 2019-11-22 13:35:47
你确定拼接出全长了？且目的条带清晰可见

确定

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4楼2019-11-22 13:50:23
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susizheng

木虫 (著名写手)
★
KM石头(金币+1): 谢谢参与
测序是确定你拼接成功的最有效办法。
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6楼2019-11-22 14:27:57
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hikingman13楼
2019-11-22 21:25   回复  
KM石头(金币+1): 谢谢参与
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nono20099楼
2019-11-22 15:08   回复  
KM石头(金币+1): 谢谢参与
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wzh3148楼
2019-11-22 14:55   回复  
KM石头(金币+1): 谢谢参与
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