| 查看: 1442 | 回复: 5 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
[求助]
如何在排除缓冲液干扰的前提下测定蛋白是否含金属离子
|
|||
| 蛋白存在于缓冲液中（含钠离子），用ICP法测定的是溶液总的元素含量，不能分辨离子（钠离子）是不是来自于蛋白质，如果用透析的办法能完全除去缓冲液中的离子吗，或者冷冻干燥获得蛋白干粉会不会还带有溶液中的离子呢？知识有限，求助大家用什么方法可以只测蛋白里面的金属离子，谢谢各位 |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有4人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有6人回复
-
为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难
已经有15人回复
-
科研人应该花精力去思考如何解决问题，而不是去凝练问题
已经有14人回复
-
要骂人了，新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西，结果有个评委还在说凝练得不够
已经有17人回复
-
基金系统什么内容也没有
已经有10人回复
-
学科评审组评审是指会评吗？
已经有5人回复
-
面上合作单位盖章
已经有9人回复
-
面上函评意见出来了，像什么等级？
已经有17人回复
-
小白求助 投论文要求的highlights应该如何写
已经有4人回复
zsygxh
金虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1110.3
- 散金: 11
- 红花: 2
- 帖子: 105
- 在线: 56.5小时
- 虫号: 2821684
- 注册: 2013-11-23
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
|
超滤离心换液本质上跟透析是一样的，都是降低离子浓度。举例来讲，比如你的蛋白体积10ml，钠离子浓度100mM,透析到1Lbuffer中，理论浓度变成1mM，再换液透析至1L buffer 中，浓度降至10uM,再换液……4次换液理论上钠离子浓度稀释了1亿倍（实际可能达不到），含量是极低的，如果仪器的灵敏度很高，这种浓度都能检测到的话，继续透析，直至低于仪器可识别范围。另外，如果蛋白结合钠离子，那么会有一个比例，比如1分子蛋白结合1分子钠离子，那么当透析到一定浓度后，不管再怎么透析，钠离子浓度几乎不再变化，你可以比较不同透析倍数的钠离子浓度也能判断。不推荐超滤离心换液，因为很可能影响蛋白稳定性，发生聚集。分子筛换液也是一种实验室规模常用的方法，脱盐柱就是一种较粗糙的分子筛，你要求高最好使用纯化用的分子筛，用长度高一点的柱子，大分子先出，小分子很晚才出。 |
5楼2019-11-12 12:07:29
zsygxh
金虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1110.3
- 散金: 11
- 红花: 2
- 帖子: 105
- 在线: 56.5小时
- 虫号: 2821684
- 注册: 2013-11-23
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2019-11-11 15:36:24
zsygxh
金虫 (小有名气)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 1110.3
- 散金: 11
- 红花: 2
- 帖子: 105
- 在线: 56.5小时
- 虫号: 2821684
- 注册: 2013-11-23
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
3楼2019-11-11 15:38:22
4楼2019-11-11 19:25:42
30