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doranicole

银虫 (小有名气)

[求助] 分类鉴定用COI,提取出来很不稳定,今天能P出来,明天就不行了,怎么回事呢?已有2人参与

用COI进行物种分类鉴定,提取DNA后扩增,当天能跑出来,保存至-20度,第二天就不能扩增出来了,不知道是因为COI太不稳定还是别的什么原因呢?请大神指教。@starseacow
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nmhsd

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
还是植物好: 金币+5, 应助指数+1, 积极应助 2020-05-25 17:20:38
有些PCR不稳定:目标高GC的,DNA富含PCR抑制剂的,长PCR反应(超过2kb),引物容易产物二聚体的,DNA聚合酶活性不封闭的(非热启动),引物3’位于SNP位点的,等等。所以请提供PCR条件(实验目的+DNA来源+PCR体系+PCR程序+引物序列)及电泳图谱,我才能具体分析。
3楼2020-05-10 14:54:06
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无知的小强

木虫 (正式写手)

★ ★ ★ ★ ★
还是植物好: 金币+5, 积极应助 2020-06-12 17:29:26
COI扩增挺稳定的,考虑是不是PCR过程设置不对?

如果过程没有问题,可以考虑换对引物试试
Behind the mask is an idea, and ideas are bulletproof.
2楼2019-12-24 13:25:09
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他山石01

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
还是植物好: 金币+5, 积极应助 2020-06-12 17:29:38
可以直接用高通量来,更稳定,效果更好
4楼2020-06-04 22:49:01
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马一佳哈哈哈

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 他山石01 at 2020-06-04 22:49:01
可以直接用高通量来,更稳定,效果更好

扩个coi就上高通量?
5楼2020-08-30 17:07:03
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