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可乐=枫

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简单快乐

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karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢补充! 7-19 20:19
引用回帖:
Originally posted by hn_xj at 2009-6-10 10:58:
由于,反相柱,一般只用,甲醇-水,乙腈-水,流动相系统。那么,
1.在这种情况下,怎样快速确定流动相的比例呢?
2.怎样快速,确定在流动相的水相中,添加多少浓度的缓冲盐,或酸,或碱呢?
3.是否,有什么计算方法,通过计算,可以快速确定流动相比例呢?而不用不断调整比例,来探索流动相的最佳比例的方法呢?

楼上很多虫友已经回答的比较好了,我只想补充一下:
1.在确定流动相比例的时候,首先要确定色谱柱,只有在色谱柱确定以后考察流动相才有意义;
2.是否确定在水相加缓冲盐、加多少需要根据你化合物的性质,如果该化合物比较容易离解,那么需要通过缓冲液控制其构型,但是缓冲液的浓度需要进一步根据化合物的性质来调整。一般磷酸钾盐比钠盐好,选择的浓度一般为20-30mM,但是不超过50mM.
做事认真就好,做人快乐就好。
31楼2009-07-19 10:30:11
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毛毛虫2618

金虫 (著名写手)

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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供! 7-19 20:19
要根据做所检测物质的极性来确定流动相的比例,用HPLC C18柱的话,一般先用甲醇-水系统,效果不好再用乙腈-水系统,峰型不好时可以用磷酸盐缓冲液-乙腈系统(但用蒸发光散射检测器时不可用盐溶液),如果物质中含羧基,可以加点乙酸,不要多,0.1%或0.2%就行了,这样基本上就能分开了,我做的东西极性相差非常小,就是用乙腈-0.1%乙酸系统分开的。。。
只要用心就能赢得精彩
32楼2009-07-19 15:14:27
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jiaban

银虫 (小有名气)


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甲醇水是最基本的,尽量不加缓冲盐,配置不方便还伤柱子,流动相就是要试来试去,何况你还前无古人后无来者。从3:7(甲醇:水)开始试吧!再说相似的化合物的文献总该有吧!做实验急不得的!
33楼2009-07-21 09:46:21
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wy82

银虫 (小有名气)

好像没有什么公式,慢慢摸索
34楼2010-04-16 10:39:09
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zuwei0803

银虫 (小有名气)


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就是要慢慢摸索,摸着石头过河嘛!
被统治者与统治者之转变,如何做?
35楼2010-04-16 11:21:33
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meizhenly

金虫 (小有名气)


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主要看你的目标化合物的极性了,或者你可以先跑一下薄层板
36楼2010-04-16 15:10:50
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