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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 求助：液相流动相探索高手帮忙啊
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可乐=枫

荣誉版主 (知名作家)

简单快乐

优秀版主优秀版主
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karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢补充！ 7-19 20:19
引用回帖:
Originally posted by hn_xj at 2009-6-10 10:58:
由于，反相柱，一般只用，甲醇－水，乙腈－水，流动相系统。那么，
１.在这种情况下，怎样快速确定流动相的比例呢？
２.怎样快速，确定在流动相的水相中，添加多少浓度的缓冲盐，或酸，或碱呢？
３.是否，有什么计算方法，通过计算，可以快速确定流动相比例呢？而不用不断调整比例，来探索流动相的最佳比例的方法呢？

楼上很多虫友已经回答的比较好了，我只想补充一下：
1.在确定流动相比例的时候，首先要确定色谱柱，只有在色谱柱确定以后考察流动相才有意义；
2.是否确定在水相加缓冲盐、加多少需要根据你化合物的性质，如果该化合物比较容易离解，那么需要通过缓冲液控制其构型，但是缓冲液的浓度需要进一步根据化合物的性质来调整。一般磷酸钾盐比钠盐好，选择的浓度一般为20-30mM,但是不超过50mM.
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做事认真就好，做人快乐就好。
31楼2009-07-19 10:30:11
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毛毛虫2618

金虫 (著名写手)
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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢提供！ 7-19 20:19
要根据做所检测物质的极性来确定流动相的比例，用HPLC C18柱的话，一般先用甲醇-水系统，效果不好再用乙腈-水系统，峰型不好时可以用磷酸盐缓冲液-乙腈系统（但用蒸发光散射检测器时不可用盐溶液），如果物质中含羧基，可以加点乙酸，不要多，0.1%或0.2%就行了，这样基本上就能分开了，我做的东西极性相差非常小，就是用乙腈-0.1%乙酸系统分开的。。。
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只要用心就能赢得精彩
32楼2009-07-19 15:14:27
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jiaban

银虫 (小有名气)
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
甲醇水是最基本的，尽量不加缓冲盐，配置不方便还伤柱子，流动相就是要试来试去，何况你还前无古人后无来者。从3：7（甲醇：水）开始试吧！再说相似的化合物的文献总该有吧！做实验急不得的！
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33楼2009-07-21 09:46:21
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wy82

银虫 (小有名气)
好像没有什么公式，慢慢摸索
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34楼2010-04-16 10:39:09
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zuwei0803

银虫 (小有名气)
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就是要慢慢摸索，摸着石头过河嘛！
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被统治者与统治者之转变，如何做？
35楼2010-04-16 11:21:33
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meizhenly

金虫 (小有名气)
★
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主要看你的目标化合物的极性了，或者你可以先跑一下薄层板
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36楼2010-04-16 15:10:50
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