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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 求助：液相流动相探索高手帮忙啊
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fuchunwang

铜虫 (初入文坛)
★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):3Q 7-8 02:33
对于单一化合物，我们都是先扫一下紫外，知道物质的最大吸收波长，在此波长下，用100%的有机相洗脱出来，再调有机相的比例，就可以啦，若有DAD检测器就更方便啦，很容易知道其纯度。
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21楼2009-07-06 09:46:33
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lcyhappy

铁虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
一般情况下是找相关的化合物的文献做为参考,来确定较快;好像没有什么计算公式!
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22楼2009-07-06 09:47:54
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chinaeye

金虫 (小有名气)
★
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我们一般用TLC确定极性后，再行估算大概的溶剂配比，三次HPLC后，基本可确定一个较合适的流动相系统。
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23楼2009-07-06 11:08:54
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melodyxw

铜虫 (初入文坛)
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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 7-8 02:32
最好先查类似物的色谱方法，以此为参考
因为色谱柱也是比较重要的，流动相试了一大圈色谱柱如果选的不合适，结果也是没有用的。
先查类似化合物用的什么柱子，在参考下方法，同时也可以看看你手头有的柱子的说明书，一般说明书上会有一个简短的指导，就是这个柱子适合的最广谱的一个流动相条件，从这里开始，再慢慢优化你的色谱条件。
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24楼2009-07-06 11:15:49
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forest95

木虫 (小有名气)
你们领导有点BT，
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25楼2009-07-08 00:51:00
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zhxf

新虫 (小有名气)
★
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先用梯度试。。再找相似的物质。。检测波长。。。pKa..
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26楼2009-07-11 18:38:40
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djc9801

金虫 (正式写手)
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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 7-14 22:12
我告诉楼主及大家一个最简单的方法：进样后，把液相的梯度设置为甲醇或乙腈从5%过度到100%的比例在一个小时。在这个梯度下，如果没有特别特殊的组分，基本上在一个小时都会出峰。波长我看还是设定254 nm吧，这是所有含有杂环物质都具有的吸收波长。至于说要不要加缓冲盐，看出峰情况再说。根据出峰情况，修改梯度，调整出峰时间。至于说要不要加缓冲盐，看峰形就知道了，如果拖尾的话，肯定要加的。

[ Last edited by djc9801 on 2009-7-14 at 15:10 ]
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27楼2009-07-14 15:08:04
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sincerejhy

木虫 (正式写手)
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karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢参与交流！ 7-15 21:38
我们做的也是和这相关的，我们总结同类化合物的测定条件，然后在其基础上调整，效果比较好的。如果峰形不好就加缓冲盐来调节。
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笃信，朴实无华，最真最美！
28楼2009-07-15 10:09:50
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小药虫

金虫 (小有名气)
★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！ 7-17 21:12
其实楼主的当前任务是在最短的时间里完成领导交给的活，所以没必要用最优的色谱条件，先把任务完成再说，具体方法是先扫一下最大吸收波长，采用乙腈-水（50：50），酸性物质加0.1%的磷酸或甲酸，碱性物质加三乙胺，中性物质先什么都不用加，对照品和待测物等浓度进样，测定即可。
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29楼2009-07-17 15:31:48
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redfox2001

铁杆木虫 (正式写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
同意三楼，补充，样品在甲醇还是乙腈的溶解度哪个好，都差不多的话，用乙腈好一些。初步确定一个粗的流动相，分离度要是不是太好再考虑用梯度。
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30楼2009-07-18 09:06:52
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