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南方科技大学公共卫生及应急管理学院2025级博士研究生招生报考通知
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fuchunwang

铜虫 (初入文坛)

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karl2100(金币+1,VIP+0):3Q 7-8 02:33
对于单一化合物,我们都是先扫一下紫外,知道物质的最大吸收波长,在此波长下,用100%的有机相洗脱出来,再调有机相的比例,就可以啦,若有DAD检测器就更方便啦,很容易知道其纯度。
21楼2009-07-06 09:46:33
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lcyhappy

铁虫 (正式写手)


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一般情况下是找相关的化合物的文献做为参考,来确定较快;好像没有什么计算公式!
22楼2009-07-06 09:47:54
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chinaeye

金虫 (小有名气)


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我们一般用TLC确定极性后,再行估算大概的溶剂配比,三次HPLC后,基本可确定一个较合适的流动相系统。
23楼2009-07-06 11:08:54
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melodyxw

铜虫 (初入文坛)

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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教! 7-8 02:32
最好先查类似物的色谱方法,以此为参考
因为色谱柱也是比较重要的,流动相试了一大圈色谱柱如果选的不合适,结果也是没有用的。
先查类似化合物用的什么柱子,在参考下方法,同时也可以看看你手头有的柱子的说明书,一般说明书上会有一个简短的指导,就是这个柱子适合的最广谱的一个流动相条件,从这里开始,再慢慢优化你的色谱条件。
24楼2009-07-06 11:15:49
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forest95

木虫 (小有名气)

你们领导有点BT,
25楼2009-07-08 00:51:00
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zhxf

新虫 (小有名气)


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先用梯度试。。再找相似的物质。。检测波长。。。pKa..
26楼2009-07-11 18:38:40
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djc9801

金虫 (正式写手)

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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教! 7-14 22:12
我告诉楼主及大家一个最简单的方法:进样后,把液相的梯度设置为甲醇或乙腈从5%过度到100%的比例在一个小时。在这个梯度下,如果没有特别特殊的组分,基本上在一个小时都会出峰。波长我看还是设定254 nm吧,这是所有含有杂环物质都具有的吸收波长。至于说要不要加缓冲盐,看出峰情况再说。根据出峰情况,修改梯度,调整出峰时间。至于说要不要加缓冲盐,看峰形就知道了,如果拖尾的话,肯定要加的。

[ Last edited by djc9801 on 2009-7-14 at 15:10 ]
27楼2009-07-14 15:08:04
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sincerejhy

木虫 (正式写手)

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karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢参与交流! 7-15 21:38
我们做的也是和这相关的,我们总结同类化合物的测定条件,然后在其基础上调整,效果比较好的。如果峰形不好就加缓冲盐来调节。
笃信,朴实无华,最真最美!
28楼2009-07-15 10:09:50
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小药虫

金虫 (小有名气)

★ ★
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karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教! 7-17 21:12
其实楼主的当前任务是在最短的时间里完成领导交给的活,所以没必要用最优的色谱条件,先把任务完成再说,具体方法是先扫一下最大吸收波长,采用乙腈-水(50:50),酸性物质加0.1%的磷酸或甲酸,碱性物质加三乙胺,中性物质先什么都不用加,对照品和待测物等浓度进样,测定即可。
29楼2009-07-17 15:31:48
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redfox2001

铁杆木虫 (正式写手)


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同意三楼,补充,样品在甲醇还是乙腈的溶解度哪个好,都差不多的话,用乙腈好一些。初步确定一个粗的流动相,分离度要是不是太好再考虑用梯度。
30楼2009-07-18 09:06:52
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