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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 载体验证
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KM石头

金虫 (正式写手)

[求助] 载体验证 已有2人参与

我有个问题想请教一下，我有个载体构建好后，转化到大肠杆菌中，菌液PCR有目的条带(阴性对照无条带)，提取质粒电泳，条带在1000左右(构建成功条带应为6000左右)，请问是什么原因，有什么方法解决？(载体培养条件:28度，180rpm,LB,红霉素200微克每毫升)

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1楼 2019-10-10 19:16:59
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13297913532

新虫 (正式写手)
★
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香，鼓励积极发帖交流互帮互助。 2019-10-11 12:17:14
双酶切跑胶看一看呗

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2楼2019-10-10 23:56:04
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
KM石头(myprayer代发): 金币+1 2019-10-11 12:17:21
6k左右的条带，一般PCR是P不太出来的。
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3楼2019-10-11 08:00:48
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GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
KM石头(myprayer代发): 金币+2, 赠人玫瑰，手有余香，鼓励积极发帖交流互帮互助。 2019-10-11 12:17:32
6K插入片段，可以酶切下，或者直接送测序，最终确定是不是装的有问题也要测序
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2019更好更棒!
4楼2019-10-11 10:55:04
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