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KM石头

金虫 (正式写手)

[求助] 载体验证 已有2人参与

我有个问题想请教一下,我有个载体构建好后,转化到大肠杆菌中,菌液PCR有目的条带(阴性对照无条带),提取质粒电泳,条带在1000左右(构建成功条带应为6000左右),请问是什么原因,有什么方法解决?(载体培养条件:28度,180rpm,LB,红霉素200微克每毫升)

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13297913532

新虫 (正式写手)



myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰,手有余香,鼓励积极发帖交流互帮互助。 2019-10-11 12:17:14
双酶切跑胶看一看呗

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2楼2019-10-10 23:56:04
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kangaroo0513

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
KM石头(myprayer代发): 金币+1 2019-10-11 12:17:21
6k左右的条带,一般PCR是P不太出来的。
3楼2019-10-11 08:00:48
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GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
KM石头(myprayer代发): 金币+2, 赠人玫瑰,手有余香,鼓励积极发帖交流互帮互助。 2019-10-11 12:17:32
6K插入片段,可以酶切下,或者直接送测序,最终确定是不是装的有问题也要测序
2019更好更棒!
4楼2019-10-11 10:55:04
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