应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 3.3K片段PCR
51/1返回列表
查看: 579  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

acq613

银虫 (正式写手)

[交流] 3.3K片段PCR

我想用普通的TAQ酶扩增3.3K的片段，有没有希望呢？有没有虫子做过啊？
下午试着扩了一次没出来任何东西。有经验的给点指导，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-06-03 22:05:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ilaveu

木虫 (著名写手)
★ ★
acq613(金币+2,VIP+0):能把反应体系说一下吗 6-3 23:23
更长都可以P出来，不是酶的问题
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2009-06-03 22:40:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答

longjianer

木虫 (著名写手)

诚心做事,踏实做人
★ ★
acq613(金币+2,VIP+0):说的详细点吧，谢谢 6-3 22:13
这个长度不是问题，引物和Mg++是关键，片断的核苷酸组成有影响。
赞一下(2人) 回复此楼
在中国，大多数经常被人提起的学术牛人，我呸！。。。我只认识在文献中让我景仰的指路人！
2楼2009-06-03 22:10:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★ ★
acq613(金币+2,VIP+0):你能把反应体系说一下吗 6-3 23:23
3.3K我没有做过,但是做过2.9K.感觉能P出来,但是前提是和你的目的Nt序列有关系,以及PCR条件的优化等.
赞一下(1人) 回复此楼
52187644
3楼2009-06-03 22:32:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ilaveu

木虫 (著名写手)
★
acq613(金币+1,VIP+0):多谢 6-4 09:27
引用回帖:
Originally posted by ilaveu at 2009-6-3 22:40:
更长都可以P出来，不是酶的问题

就是一般的10ul体系啊

10xPCR buffer：1ul
taq：0.2ul
dNTP：0.2~0.5ul
质粒：0.2ul（菌落也可以）
ddH2O：补平10ul

退火温度可以设梯度52~62 c
延伸3min30s

或者要是你还没有扩出来
可以用takara LAtaq扩增长片段
效率较高

[ Last edited by ilaveu on 2009-6-3 at 23:38 ]
赞一下 回复此楼
5楼2009-06-03 23:31:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 11 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 284求调剂 +14 Zhao anqi 2026-03-22 14/700 2026-03-25 10:40 by userper
[考研] 生物学学硕求调剂 +7 小羊睡着了? 2026-03-23 10/500 2026-03-25 02:24 by 清风拂扬。 m
[考研] 08工学调剂 +12 用户573181 2026-03-20 17/850 2026-03-24 21:45 by 番茄炖了西红柿
[考研] 调剂 +4 13853210211 2026-03-24 4/200 2026-03-24 19:44 by ms629
[考研] 291求调剂 +3 HanBeiNingZC 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:34 by barlinike
[考研] 344求调剂 +3 desto 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:09 by 搏击518
[考研] 一志愿哈工大，085400，320，求调剂 +3 gdlf9999 2026-03-24 3/150 2026-03-24 10:08 by 搏击518
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +6 ￣^￣゜汗 2026-03-19 9/450 2026-03-23 19:53 by pswait
[考研] 323求调剂 +6 洼小桶 2026-03-18 6/300 2026-03-23 00:29 by king123！
[考研] 275求调剂 +6 shansx 2026-03-22 8/400 2026-03-22 15:27 by barlinike
[考研] 260求调剂 +3 朱芷琳 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:12 by 朱芷琳
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 求助 +5 梦里的无言 2026-03-21 6/300 2026-03-21 17:51 by 学员8dgXkO
[考研] 0703化学297求调剂 +3 Daisy☆ 2026-03-20 3/150 2026-03-21 17:45 by ColorlessPI
[考研] 材料 271求调剂 +5 展信悦_ 2026-03-21 5/250 2026-03-21 17:29 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] 296求调剂 +6 www_q 2026-03-18 10/500 2026-03-20 23:56 by JourneyLucky
[考研] 一志愿苏州大学材料求调剂，总分315（英一） +5 sbdksD 2026-03-19 5/250 2026-03-20 22:10 by luoyongfeng
[考研] 295材料求调剂，一志愿武汉理工085601专硕 +5 Charlieyq 2026-03-19 5/250 2026-03-20 20:35 by JourneyLucky
[考研] 一志愿西安交通大学 学硕 354求调剂211或者双一流 +3 我想要读研究生 2026-03-20 3/150 2026-03-20 20:13 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭