应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 3.3K片段PCR
111/2返回列表12下一页
查看: 587  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

acq613

银虫 (正式写手)

[交流] 3.3K片段PCR

我想用普通的TAQ酶扩增3.3K的片段，有没有希望呢？有没有虫子做过啊？
下午试着扩了一次没出来任何东西。有经验的给点指导，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-06-03 22:05:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longjianer

木虫 (著名写手)

诚心做事,踏实做人
★ ★
acq613(金币+2,VIP+0):说的详细点吧，谢谢 6-3 22:13
这个长度不是问题，引物和Mg++是关键，片断的核苷酸组成有影响。
赞一下(2人) 回复此楼
在中国，大多数经常被人提起的学术牛人，我呸！。。。我只认识在文献中让我景仰的指路人！
2楼2009-06-03 22:10:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★ ★
acq613(金币+2,VIP+0):你能把反应体系说一下吗 6-3 23:23
3.3K我没有做过,但是做过2.9K.感觉能P出来,但是前提是和你的目的Nt序列有关系,以及PCR条件的优化等.
赞一下(1人) 回复此楼
52187644
3楼2009-06-03 22:32:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ilaveu

木虫 (著名写手)
★ ★
acq613(金币+2,VIP+0):能把反应体系说一下吗 6-3 23:23
更长都可以P出来，不是酶的问题
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2009-06-03 22:40:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ilaveu

木虫 (著名写手)
★
acq613(金币+1,VIP+0):多谢 6-4 09:27
引用回帖:
Originally posted by ilaveu at 2009-6-3 22:40:
更长都可以P出来，不是酶的问题

就是一般的10ul体系啊

10xPCR buffer：1ul
taq：0.2ul
dNTP：0.2~0.5ul
质粒：0.2ul（菌落也可以）
ddH2O：补平10ul

退火温度可以设梯度52~62 c
延伸3min30s

或者要是你还没有扩出来
可以用takara LAtaq扩增长片段
效率较高

[ Last edited by ilaveu on 2009-6-3 at 23:38 ]
赞一下 回复此楼
5楼2009-06-03 23:31:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

695

木虫 (职业作家)
应该没问题吧，我还准备P一个4kb的呢，祝顺利
赞一下 回复此楼
6楼2009-06-03 23:35:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

michaelwuqingyu

金虫 (正式写手)
★
acq613(金币+1,VIP+0):多谢 6-4 09:27
没问题，但是PCR10ul体系是不是少点？降低退火温度
赞一下 回复此楼
7楼2009-06-04 09:07:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

acq613

银虫 (正式写手)
695，michaelwuqingyu  各加仨个金币，烦请楼主？我不会加
赞一下 回复此楼
8楼2009-06-04 09:28:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jin56419303

木虫 (小有名气)
确实不是酶的问题，多试试退火温度，再看看你的引物确保没问题
赞一下 回复此楼
9楼2009-06-04 15:16:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longxiange520

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
没什么问题的，　可以扩增出来的！
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2009-06-04 15:50:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 acq613 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 北科281学硕材料求调剂 +11 tcxiaoxx 2026-03-20 13/650 2026-03-25 15:38 by barlinike
[考研] 329求调剂 +3 钮恩雪 2026-03-25 3/150 2026-03-25 14:43 by 糖加冰
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 9/450 2026-03-25 13:37 by α____
[考研] 081700 调剂 267分 +10 迷人的哈哈 2026-03-23 10/500 2026-03-25 12:12 by userper
[考研] 生物技术与工程 +3 1294608413 2026-03-25 3/150 2026-03-25 10:45 by hxsm
[考研] 286求调剂 +11 Faune 2026-03-21 11/550 2026-03-25 10:11 by 雾散后相遇lc
[考研] 318求调剂 +3 plum李子 2026-03-23 3/150 2026-03-25 09:42 by 雾散后相遇lc
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +6 niko- 2026-03-22 6/300 2026-03-25 09:14 by aa331100
[考研] 085601求调剂总分293英一数二 +3 钢铁大炮 2026-03-24 3/150 2026-03-24 22:03 by bingxueer79
[考研] 276求调剂。有半年电池和半年高分子实习经历 +9 材料学257求调剂 2026-03-23 10/500 2026-03-24 07:36 by wangy0907
[考研] 一志愿武理材料工程348求调剂 +6 ￣^￣゜汗 2026-03-19 9/450 2026-03-23 19:53 by pswait
[考研] 生物学一志愿985，分数349求调剂 +6 zxts12 2026-03-21 9/450 2026-03-23 18:37 by macy2011
[考研] 352求调剂 +3 大米饭！ 2026-03-22 3/150 2026-03-22 23:28 by king123！
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 生物学调剂 +5 Surekei 2026-03-21 5/250 2026-03-22 14:39 by tcx007
[考研] 材料求调剂 +5 @taotao 2026-03-21 5/250 2026-03-21 20:55 by lbsjt
[考研] 考研调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-21 3/150 2026-03-21 20:04 by 无际的草原
[考研] 22 350 本科985求调剂，求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 材料与化工 322求调剂 +4 然11 2026-03-19 4/200 2026-03-20 22:12 by luoyongfeng
[考研] 求调剂 +3 @taotao 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:35 by JourneyLucky
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭