应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 3.3K片段PCR
111/2返回列表12下一页
查看: 573  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前主题已经存档。

acq613

银虫 (正式写手)

[交流] 3.3K片段PCR

我想用普通的TAQ酶扩增3.3K的片段，有没有希望呢？有没有虫子做过啊？
下午试着扩了一次没出来任何东西。有经验的给点指导，谢谢！
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2009-06-03 22:05:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longjianer

木虫 (著名写手)

诚心做事,踏实做人
★ ★
acq613(金币+2,VIP+0):说的详细点吧，谢谢 6-3 22:13
这个长度不是问题，引物和Mg++是关键，片断的核苷酸组成有影响。
赞一下(2人) 回复此楼
在中国，大多数经常被人提起的学术牛人，我呸！。。。我只认识在文献中让我景仰的指路人！
2楼2009-06-03 22:10:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dianaofyezi

金虫 (正式写手)
★ ★
acq613(金币+2,VIP+0):你能把反应体系说一下吗 6-3 23:23
3.3K我没有做过,但是做过2.9K.感觉能P出来,但是前提是和你的目的Nt序列有关系,以及PCR条件的优化等.
赞一下(1人) 回复此楼
52187644
3楼2009-06-03 22:32:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ilaveu

木虫 (著名写手)
★ ★
acq613(金币+2,VIP+0):能把反应体系说一下吗 6-3 23:23
更长都可以P出来，不是酶的问题
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2009-06-03 22:40:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ilaveu

木虫 (著名写手)
★
acq613(金币+1,VIP+0):多谢 6-4 09:27
引用回帖:
Originally posted by ilaveu at 2009-6-3 22:40:
更长都可以P出来，不是酶的问题

就是一般的10ul体系啊

10xPCR buffer：1ul
taq：0.2ul
dNTP：0.2~0.5ul
质粒：0.2ul（菌落也可以）
ddH2O：补平10ul

退火温度可以设梯度52~62 c
延伸3min30s

或者要是你还没有扩出来
可以用takara LAtaq扩增长片段
效率较高

[ Last edited by ilaveu on 2009-6-3 at 23:38 ]
赞一下 回复此楼
5楼2009-06-03 23:31:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

695

木虫 (职业作家)
应该没问题吧，我还准备P一个4kb的呢，祝顺利
赞一下 回复此楼
6楼2009-06-03 23:35:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

michaelwuqingyu

金虫 (正式写手)
★
acq613(金币+1,VIP+0):多谢 6-4 09:27
没问题，但是PCR10ul体系是不是少点？降低退火温度
赞一下 回复此楼
7楼2009-06-04 09:07:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

acq613

银虫 (正式写手)
695，michaelwuqingyu  各加仨个金币，烦请楼主？我不会加
赞一下 回复此楼
8楼2009-06-04 09:28:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jin56419303

木虫 (小有名气)
确实不是酶的问题，多试试退火温度，再看看你的引物确保没问题
赞一下 回复此楼
9楼2009-06-04 15:16:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longxiange520

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
没什么问题的，　可以扩增出来的！
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2009-06-04 15:50:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 acq613 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] B区考研调剂 +3 yqdszhdap－ 2026-03-22 4/200 2026-03-25 08:19 by mx.yue
[考研] 一志愿北化315 求调剂 +3 akrrain 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:35 by 了了了了。。
[考研] 材料学硕，求调剂 6+3 糖葫芦888ll 2026-03-22 7/350 2026-03-24 17:11 by hello七七
[考研] 305分求调剂（食品工程） +5 Sxy112 2026-03-21 7/350 2026-03-24 12:27 by 544594351
[考研] 材料/农业专业，07/08开头均可，过线就行 +3 呵唔哦豁 2026-03-23 4/200 2026-03-23 22:30 by 汪！？！
[考研] 一志愿中南大学化学学硕0703总分337求调剂 +5 niko- 2026-03-22 5/250 2026-03-23 22:01 by fuyu_
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[考研] 291求调剂 +5 孅華 2026-03-22 5/250 2026-03-23 09:20 by haoshis
[考研] 317求调剂 +12 申子申申 2026-03-19 18/900 2026-03-22 22:23 by luoyongfeng
[考研] 求调剂一志愿海大，0703化学学硕304分，有大创项目，四级已过 +6 幸运哩哩 2026-03-22 10/500 2026-03-22 20:10 by edmund7
[考研] 一志愿中南化学（0703）总分337求调剂 +9 niko- 2026-03-19 10/500 2026-03-22 16:08 by ColorlessPI
[考研] 319求调剂 +4 小力气珂珂 2026-03-20 4/200 2026-03-22 15:53 by ColorlessPI
[考研] 313求调剂 +4 肆叁贰壹22 2026-03-19 4/200 2026-03-21 17:33 by ColorlessPI
[考研] 求调剂 +3 .m.. 2026-03-21 4/200 2026-03-21 16:25 by barlinike
[考研] 22 350 本科985求调剂，求老登收留 +3 李轶男003 2026-03-20 3/150 2026-03-21 13:28 by 搏击518
[考研] 一志愿华中科技大学，080502，354分求调剂 +5 守候夕阳CF 2026-03-18 5/250 2026-03-21 01:06 by JourneyLucky
[考研] 南京大学化学376求调剂 +3 hisfailed 2026-03-19 6/300 2026-03-20 23:43 by hisfailed
[考研] 295求调剂 +4 一志愿京区211 2026-03-18 6/300 2026-03-20 23:41 by JourneyLucky
[考研] 考研调剂求学校推荐 +3 伯乐29 2026-03-18 5/250 2026-03-20 22:59 by JourneyLucky
[考研] 一志愿南理工085701环境302求调剂院校 +3 葵梓卫队 2026-03-20 3/150 2026-03-20 19:28 by zhukairuo
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭