24小时热门版块排行榜    

查看: 993  |  回复: 11
当前主题已经存档。

无争1209

银虫 (小有名气)

[交流] 质粒电泳中超螺旋带的判定

我跑的是pBR322,想用其来检测一种酶的活性,需要得到这个质粒的比较清晰的超螺旋带,然后加上一种酶看其超螺旋带是否消失?问题是跑了很多次,有时候出现两条带,有时候三条带。两条带的时候最前面哪一条是不是超螺旋带呢?三条带的时候,最前面的条带亮度比较弱,是不是超螺旋带,还是紧跟其后的那条带是超螺旋带?还有质粒在4度保存是不是降解的很快。因为每次用几微升,用量很少,放在4度待了几天,结果刚开始跑还是一条带,后来两条,再后来成了三条,这是不是质粒降解的缘故?还有我如果放在负20度冰箱,每次用的时候融化,这样质粒会不会降解的比较快?还是在4度降解的快?这两种方法哪个降解速度会慢一些?请各位虫友指教!谢谢!
回复此楼

» 猜你喜欢

人生的道路虽然漫长,但紧要处常常只有几步,特别是当人年轻的时候。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

大海一孤舟

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
质粒提取有两条带,三条带都很正常。跑在最前面应该是超螺旋的。对于质粒的保存,我习惯用-20度。4度时DNA酶的活性还是很强的哈哈
2楼2009-06-03 14:27:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ilaveu

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有时候提取的质粒状态与试剂盒有关吧?
3楼2009-06-03 14:44:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由,人权之基。

优秀版主

无论是两条带还是三条带,跑在最前面都应该是超螺旋的!
一般认为在-20度保存比较久。用TE溶更好
质粒降解很慢的 60度以下应该都还算比较稳定的 低温应该没限度
据说质粒可以保存10年以上!
从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
4楼2009-06-03 16:12:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

rna2008

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
用超螺旋的marker啊。一般最前面的是超螺旋的,
5楼2009-06-07 19:58:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

savetheday

银虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
当然是最前面的.另外-20度保存更好些
Godbless
6楼2009-06-07 20:14:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

smurfen

至尊木虫 (著名写手)

最前面的肯定是超螺旋的
超螺旋的很小呢
5k的超螺旋质粒比2kb的marker大不了多少
Advances in Prevention of Thermal Runaway in Lithium-Ion Batteries
7楼2009-06-07 20:20:27
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无争1209

银虫 (小有名气)

非常感谢!
人生的道路虽然漫长,但紧要处常常只有几步,特别是当人年轻的时候。
8楼2009-06-17 10:50:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

longxiange520

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
一般都放在-20度保存,拿出来用也没有什么问题的,质粒讲解没那么快的!
9楼2009-06-17 10:58:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ym3612003

铁杆木虫 (著名写手)

修己 慎独 思勤


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
你的酶是用来切dna的吗?
最想要去的地方,怎能在半路就返航!!!
10楼2009-06-17 11:36:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 无争1209 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 299求调剂 +6 shxchem 2026-03-20 8/400 2026-03-25 10:18 by 雾散后相遇lc
[考研] 295求调剂 +5 一志愿京区211 2026-03-18 7/350 2026-03-25 09:52 by 雾散后相遇lc
[考研] 0854电子信息求调剂 +7 α____ 2026-03-22 8/400 2026-03-25 08:02 by 噜gkvc
[考研] 材料调剂 +6 匹克i 2026-03-23 6/300 2026-03-24 21:09 by greychen00
[考研] 材料学硕333求调剂 +3 北道巷 2026-03-24 3/150 2026-03-24 19:17 by pswait
[考研] 收08调剂生 +6 komorebi69 2026-03-18 6/300 2026-03-24 19:09 by 汪!?!
[考研] 材料专硕找调剂 +5 哈哈哈吼吼吼哈 2026-03-23 5/250 2026-03-24 19:07 by 了了了了。。
[考研] 求调剂 +5 林之夕 2026-03-24 5/250 2026-03-24 17:16 by dick_runner
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 080500求调剂 +3 zzzzfan 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:38 by barlinike
[考研] 291求调剂 +3 HanBeiNingZC 2026-03-24 3/150 2026-03-24 16:34 by barlinike
[考研] 材料与化工328分调剂 +4 。,。,。,。i 2026-03-23 4/200 2026-03-24 11:03 by 544594351
[考研] 327求调剂 +5 prayer13 2026-03-23 5/250 2026-03-23 22:11 by 星空星月
[考研] 306求调剂 +9 chuanzhu川烛 2026-03-18 9/450 2026-03-23 13:17 by luoyongfeng
[考研] 308求调剂 +3 墨墨漠 2026-03-21 3/150 2026-03-22 16:54 by i_cooler
[考研] 求调剂 +7 Auroracx 2026-03-22 7/350 2026-03-22 12:38 by 素颜倾城1988
[考研] 初试 317 +7 半拉月丙 2026-03-20 7/350 2026-03-21 22:26 by peike
[考研] 求调剂 +4 要好好无聊 2026-03-21 4/200 2026-03-21 18:57 by 学员8dgXkO
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-20 7/350 2026-03-21 16:36 by barlinike
[考研] A区线材料学调剂 +5 周周无极 2026-03-20 5/250 2026-03-20 21:33 by laoshidan
信息提示
请填处理意见