24小时热门版块排行榜    

查看: 1316  |  回复: 11
当前主题已经存档。
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

无争1209

银虫 (小有名气)

[交流] 质粒电泳中超螺旋带的判定

我跑的是pBR322,想用其来检测一种酶的活性,需要得到这个质粒的比较清晰的超螺旋带,然后加上一种酶看其超螺旋带是否消失?问题是跑了很多次,有时候出现两条带,有时候三条带。两条带的时候最前面哪一条是不是超螺旋带呢?三条带的时候,最前面的条带亮度比较弱,是不是超螺旋带,还是紧跟其后的那条带是超螺旋带?还有质粒在4度保存是不是降解的很快。因为每次用几微升,用量很少,放在4度待了几天,结果刚开始跑还是一条带,后来两条,再后来成了三条,这是不是质粒降解的缘故?还有我如果放在负20度冰箱,每次用的时候融化,这样质粒会不会降解的比较快?还是在4度降解的快?这两种方法哪个降解速度会慢一些?请各位虫友指教!谢谢!
回复此楼
人生的道路虽然漫长,但紧要处常常只有几步,特别是当人年轻的时候。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dyyyyy

铁杆木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
听说用低浓度的抗生素培养液,可以增加紧密型质粒的比率
11楼2009-06-17 13:59:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 12 个回答

大海一孤舟

铜虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
质粒提取有两条带,三条带都很正常。跑在最前面应该是超螺旋的。对于质粒的保存,我习惯用-20度。4度时DNA酶的活性还是很强的哈哈
2楼2009-06-03 14:27:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ilaveu

木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
有时候提取的质粒状态与试剂盒有关吧?
3楼2009-06-03 14:44:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

houjinglhy

荣誉版主 (文坛精英)

表达自由,人权之基。

优秀版主

无论是两条带还是三条带,跑在最前面都应该是超螺旋的!
一般认为在-20度保存比较久。用TE溶更好
质粒降解很慢的 60度以下应该都还算比较稳定的 低温应该没限度
据说质粒可以保存10年以上!
从小就学习鲁迅,直到现在才体会到他当时是多么的绝望和无助,却仍要用尽最后一丝力气声嘶力竭的呐喊!
4楼2009-06-03 16:12:33
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律 +32 医学老男孩 2026-08-13 74/3700 2026-08-16 21:05 by 医学老男孩
[论文投稿] 岩土工程学报什么时候才能终审完呐 25+3 yeager111 2026-08-10 4/200 2026-08-16 20:42 by tfang
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +13 archvillain 2026-08-15 25/1250 2026-08-16 20:13 by zhaosm1982
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +3 Tide man 2026-08-14 3/150 2026-08-16 17:47 by jurkat.1640
[精细化工] 招聘 金属平磨液,抛光液研发工程师 +3 小天0311 2026-08-14 3/150 2026-08-16 07:31 by H9PLUS
[基金申请] filecode +8 cratir 2026-08-14 12/600 2026-08-15 18:08 by zyfgau
[基金申请] 关于Filecode分析方法 +10 majunge000 2026-08-10 13/650 2026-08-15 12:26 by hanpeng972
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
[基金申请] 奇怪,两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +8 布布和一二 2026-08-10 11/550 2026-08-14 14:58 by Equinoxhua
[硕博家园] 读博的好处 +4 lnee 2026-08-11 4/200 2026-08-14 10:20 by ahsoarli
[基金申请] filecode +15 documentary 2026-08-10 17/850 2026-08-14 10:08 by kissu88
[基金申请] FileCode能看出啥? +10 要乐观耀哥 2026-08-10 32/1600 2026-08-14 09:37 by 要乐观耀哥
[基金申请] 重要来源:本周末出结果 +10 瞬息宇宙 2026-08-12 10/500 2026-08-13 15:46 by likettle
[基金申请] Filecode 又变了,巨变 +3 WH3796 2026-08-12 4/200 2026-08-13 14:13 by 小木虫6752397
[基金申请] 结合人工智能,周易传统文化,filecode打分制来了,3分以上希望很大。 +3 Tide man 2026-08-12 4/200 2026-08-13 08:35 by ZJTJZ
[基金申请] 2019年青年基金涵评意见,大家看看几个A,几个B? +11 Tide man 2026-08-11 11/550 2026-08-13 07:35 by 撸猫猫
[基金申请] 帮忙看看fileCode +7 wwncly 2026-08-10 13/650 2026-08-11 19:36 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 什么时候出结果,有咨询渠道??? +3 Tide man 2026-08-11 3/150 2026-08-11 17:54 by kudofaye
[基金申请] 确定了,国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
信息提示
请填处理意见