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cathy97031新虫 (初入文坛)
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RNA能作为模板扩增出条带吗？ 已有3人参与
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用omega试剂盒提RNA，然后promega的DNase I消化，最后thremofisher逆转录试剂盒获得cDNA 用逆转录试剂盒中提供的GAPDH的引物（理论扩增大小为500bp左右）进行验证 模板分别用未消化的RNA、DNase I消化后的RNA 和cDNA 神奇的事情发生了：只有未消化RNA为模板扩增出500bp大小的产物，在700多的地方也有比较弱的条带；而另外两个模板都没有扩增出东西 那么问题来了：如果我的RNA 有基因组DNA污染，那么扩增出来的GAPDH大小只应该在700多bp的地方（因为该引物跨内含子），那500位置的那条带是什么？非常明显的一条带，难道是非特异扩增？或者是直接以RNA为模板获得的？ 百思不得其解，担心自己样品混淆，重复了一遍，仍然是这个结果。  所以，这是为什么，向大神求解。。。 |
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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-08-27 22:22:28
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-08-27 22:22:28
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国内试验条件不行，水都不是纯水，很多时候都是复合物因素，没办法单独说明那个因素，你重新做，小心一些就好 发自小木虫IOS客户端 |
6楼2019-08-27 19:27:06
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7楼2019-08-27 21:38:22
xinxiyuzhou
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