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关于使用高压破碎机提取蛋白 已有9人参与
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我是做蛋白原核表达的，诱导表达之后用的是超声破碎，破碎效果一直不太好，破好几遍菌液还是很浑，产热也特别严重，而且破一批样品需要一下午，比较浪费时间。 最近正好隔壁实验室新买了一台高压细胞破碎机UH-06，借用了一下发现效果还不错，在这里分享一下心得体会。 我破的是大肠杆菌，使用的时候压力加到了800 bar，以这个压力破碎了两遍样品就很清澈了，而且跑电泳之后发现蛋白量也比超声破碎时高了一些，分析之后认为应该是高压破碎产热少，出料温度比较低，所以对蛋白的影响会小一些。而使用超声破碎仪破碎之后样品的温度通常会很高，放冰浴里效果也不大。 我的样品量大概有100 mL，在800bar条件下用高压破碎机破两遍也只要10分钟，跟超声破碎比起来就会节省很多时间。 总体用下来还是感觉高压破碎比超声破碎用起来方便一些。但大部分实验室现在都用的是超声破碎，高压破碎机好像知道的也比较少？ 有其他用过高压细胞破碎机的大神们也可以交流一下使用心得。 |
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3楼2019-08-26 23:25:55
MAS_rice
至尊木虫 (著名写手)
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请问你的100ml是菌体100ml还是离心后重悬的100ml？ 发自小木虫IOS客户端 |
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