24小时热门版块排行榜    

查看: 2085  |  回复: 5

分子小白呀

新虫 (小有名气)

[交流] cDNA浓度和OD值问题 已有1人参与

作为分子新手,好多小问题都没办法确定,想问一下大家,反转录之后,怎么测定cDNA的浓度?需要稀释多少倍?实验室有Nano drop 2000可以用,另外,多大的浓度可以用于下一步的PCR?260/280和260/230的比值多少比较正常?我是做基因克隆,目的基因片段319bp。感谢前辈不吝赐教!

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
逆转录一般默认转录效率是固定的,因为是相对定量,用你加入逆转录的rna定量
2楼2019-08-22 11:54:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)

★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
cdna稀释倍数看个人习惯,一个pcr反应需要的cdna量根据你用试剂说明书确定就行,稀释倍数自己把握。

发自小木虫Android客户端
3楼2019-08-22 11:56:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)

cdna用量参考pcr试剂说明书就行了

发自小木虫Android客户端
4楼2019-08-22 11:57:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)

喜欢度比值,一般在rna这一步测。具体范围不太记得了,百度一下就可以。

发自小木虫Android客户端
5楼2019-08-22 11:58:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2019-08-22 22:15:52
片段不大,怎么弄都行。做真核表达载体的话,注意移码,方向。其他都还好找个做过的人带你做一遍就很简单了。

发自小木虫Android客户端
6楼2019-08-22 11:59:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 分子小白呀 的主题更新
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[有机交流] 同一个分子,一条来自文献,一条来自AI——不告诉你答案,你会选哪条? +5 tianxiaoxian 2026-09-28 9/450 2026-10-02 19:54 by yunshui01
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 4/200 2026-10-01 21:07 by Equinoxhua
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +7 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 8/400 2026-10-01 19:08 by Equinoxhua
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-10-01 09:23 by Equinoxhua
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 (EPI+-1)(金币-50) +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 4/200 2026-09-30 16:52 by Z9YWQ5EAO3qp
[公派出国] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 cqwQDCxMcL3I 2026-09-29 4/200 2026-09-30 13:35 by C3vABopYbZJS
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +4 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:54 by yCO1Ll7aHtsw
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 4/200 2026-09-29 16:37 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 16:03 by etmYJ6d2rquH
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 tqUTOxClQUMF 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:58 by etmYJ6d2rquH
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +6 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:41 by etmYJ6d2rquH
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-29 14:30 by etmYJ6d2rquH
[找工作] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +6 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-29 14:13 by etmYJ6d2rquH
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 ZYXdhzDAy9ZX 2026-09-28 3/150 2026-09-29 06:42 by ZvyPK8n6Nfki
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 GDBe8tDZqE8z 2026-09-28 3/150 2026-09-28 23:12 by b8fCuTHqckEt
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 CfXuS1rDhLYN 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[公派出国] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 22:55 by ez6fGg9abYaj
[找工作] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 5/250 2026-09-28 22:32 by ez6fGg9abYaj
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 6/300 2026-09-28 22:15 by ez6fGg9abYaj
[考研] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 IDs3scOF0tjC 2026-09-28 4/200 2026-09-28 18:51 by 9lS3ad5oOymn
信息提示
请填处理意见