24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 2000  |  回复: 5

分子小白呀

新虫 (小有名气)

[交流] cDNA浓度和OD值问题 已有1人参与

作为分子新手,好多小问题都没办法确定,想问一下大家,反转录之后,怎么测定cDNA的浓度?需要稀释多少倍?实验室有Nano drop 2000可以用,另外,多大的浓度可以用于下一步的PCR?260/280和260/230的比值多少比较正常?我是做基因克隆,目的基因片段319bp。感谢前辈不吝赐教!

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
逆转录一般默认转录效率是固定的,因为是相对定量,用你加入逆转录的rna定量
2楼2019-08-22 11:54:34
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
cdna稀释倍数看个人习惯,一个pcr反应需要的cdna量根据你用试剂说明书确定就行,稀释倍数自己把握。

发自小木虫Android客户端
3楼2019-08-22 11:56:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)

cdna用量参考pcr试剂说明书就行了

发自小木虫Android客户端
4楼2019-08-22 11:57:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)

喜欢度比值,一般在rna这一步测。具体范围不太记得了,百度一下就可以。

发自小木虫Android客户端
5楼2019-08-22 11:58:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

choujiaoqi

铁杆木虫 (知名作家)

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2019-08-22 22:15:52
片段不大,怎么弄都行。做真核表达载体的话,注意移码,方向。其他都还好找个做过的人带你做一遍就很简单了。

发自小木虫Android客户端
6楼2019-08-22 11:59:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 分子小白呀 的主题更新
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 投稿求助,期刊 +3 希冀,有书读 2026-05-20 4/200 2026-05-21 11:07 by 希冀,有书读
[基金申请] 评审有感 +15 popular289 2026-05-18 26/1300 2026-05-21 10:35 by 西葫芦炒鸡蛋
[基金申请] 今年审到国自然15份,谈谈感受 +21 国自然国社科中 2026-05-17 22/1100 2026-05-21 09:37 by 2000zf36392
[论文投稿] Sci. Bull. 悲剧经验 +7 jyang1999 2026-05-16 8/400 2026-05-21 08:50 by 能丫
[基金申请] 河北省自然科学基金 +4 Peterchao 2026-05-18 4/200 2026-05-21 08:17 by articlefan
[论文投稿] 投MDPI的三个期刊都被桌拒 +3 木虫研究牲 2026-05-17 4/200 2026-05-21 08:02 by bobvan
[考博] 云南大学材料与能源学院解琳课题组钙钛矿博士招生 +4 光伏爱好者 2026-05-17 6/300 2026-05-21 01:37 by 17520222914
[有机交流] 反应很差,大量原料没有反应 5+3 Mr.Zot 2026-05-19 8/400 2026-05-20 22:19 by Equinoxhua
[基金申请] 国自然评分 +3 无名者登山 2026-05-20 4/200 2026-05-20 13:29 by vito刘
[有机交流] 如何实现卤原子转化 +3 BT20230424 2026-05-15 8/400 2026-05-20 09:32 by xtlilibin
[教师之家] 上海大学实验技术岗位非升即走 +12 嘻嘻哈哈乐呵呵 2026-05-15 13/650 2026-05-20 08:34 by xli1984
[基金申请] 2026山东省优青 +3 luckinging 2026-05-14 4/200 2026-05-19 16:15 by 52wls
[考博] 找博士生导师 +6 小代想上岸 2026-05-15 7/350 2026-05-19 10:22 by free_fisher
[考博] 26/27申博自荐-锂/钠电池方向 5+3 狗头军师. 2026-05-15 4/200 2026-05-19 09:10 by moonboat
[基金申请] 同样的基金本子,换个专家直接从C变A! (金币-10) +3 国自然国社科中 2026-05-19 3/150 2026-05-19 08:50 by Equinoxhua
[考博] 2026博士还有哪些学校有名额 +7 小王求读研 2026-05-15 8/400 2026-05-19 08:27 by zhyzzh
[考博] 博士申请 +5 星…… 2026-05-18 6/300 2026-05-18 23:49 by 糊糊涂涂好
[硕博家园] 我在等一个没有答案的答案 +3 Love_MH 2026-05-17 3/150 2026-05-18 02:22 by 竹林孤影
[考博] 光量子物理方向 博士招生 1人(2026.09) +3 sandyworld 2026-05-15 4/200 2026-05-17 14:38 by sandyworld
[硕博家园] 申请博士 +3 呃?呃 2026-05-15 3/150 2026-05-16 11:01 by a4742549
信息提示
请填处理意见