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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 胶回收需要用loading buffer吗？
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小白hmmm

新虫 (初入文坛)

[求助] 胶回收需要用loading buffer吗？ 已有3人参与

实验小白，师兄教的时候是跑胶，要用loading buffer,看有没有条带。
胶回收没教，只说了一下。不知道需不需要用loading buffer 。

@biostar2009 @飞约疯人院 @飞约疯人院 发自小木虫Android客户端
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1楼 2019-08-17 10:18:34
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金平果

新虫 (著名写手)
需要的

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2楼2019-08-17 12:19:42
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萌萌婧婧

新虫 (小有名气)
要的

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3楼2019-08-17 14:50:30
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xuweitao

铁杆木虫 (著名写手)
★ ★ ★
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2019-08-21 21:49:51
其实跑大孔胶的时候可以用甘油溶液代替loading buffer的。你看看loading buffer的配方，一般是缓冲液配以20%左右的甘油，再加些指示剂显色。甘油是增加比重的，保证混合DNA样品后密度比缓冲液大。把指示剂拿掉肯定没问题的，只是没有颜色，小孔不容易判断样品有没有加进孔内。
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4楼2019-08-19 08:35:15
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xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2019-08-21 21:50:02
要加的，loading buffer主要的作用是指示条带和使DNA片段沉降在孔内。loading buffer不影响胶回收的效果的。
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5楼2019-08-19 18:16:00
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-08-21 21:50:12
loading buffer帮助DNA沉积，没有的话DNA容易飘出来。
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6楼2019-08-21 12:23:09
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婉柳

新虫 (小有名气)
加loading buffer的话，上样20微升，加多少合适？

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7楼2019-12-29 17:43:41
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雨独步

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by 婉柳 at 2019-12-29 17:43:41
加loading buffer的话，上样20微升，加多少合适？

这得看你的loading buffer是几倍浓缩的啊，和你的样品混合后是1*的就行。NEB公司随酶附送的loading是6*的，加样品的五分之一混匀上样。
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8楼2019-12-29 20:15:33
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婉柳

新虫 (小有名气)
是6×的loading buffer

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9楼2019-12-29 20:21:42
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