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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » pcr扩增产物直接胶回收可以吗？
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小白hmmm

新虫 (初入文坛)

[求助] pcr扩增产物直接胶回收可以吗？ 已有1人参与

①本人菜鸟，想问一下pcr扩增后，5ul跑胶出现单一条带，剩下的不进行切胶回收，直接送去测序可以吗？
②连续三次，都是跑胶没问题，胶回收测序出不来。想知道是不是胶回收没做好？

@飞约疯人院 @wizardfan 发自小木虫Android客户端
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1楼 2019-07-30 09:00:51
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木元雨

木虫 (职业作家)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-07-30 22:04:29
有直接测pcr产物的，不过你要和测序公司沟通引物的问题。胶回收后，可以做个t克隆，转到大肠杆菌里面测菌液

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2楼2019-07-30 09:13:05
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青橙子皮

禁虫 (小有名气)
★
西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-07-30 22:04:39
本帖内容被屏蔽
3楼2019-07-30 09:24:34
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GRUBBY_WU

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
西门吹雪170: 金币+3, 鼓励回帖交流 2019-07-30 22:04:51
pcr单一条带可以消化dntp和primer后直接测序（一般公司做消化），如果条带不带一胶回收后测序，条带单一可能含多种产物，大小相同，做ta克隆在送菌液测序。正常情况下条带单一，切胶纯化后测不出来没信号可能是提供引物有问题，乱峰可能是有ploy结构，换另一个引物测。送公司pcr产物测序，对方也会取部分跑胶检查条带是否单一，单一直接消化，不带一也是切角纯化后测的

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2019更好更棒!
4楼2019-07-30 10:28:43
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