| 查看: 1079 | 回复: 5 | ||
[求助]
融合蛋白进行酶切后，目的蛋白不流穿已有2人参与
|
|
我的蛋白具组氨酸标签，镍柱纯化后得到的融合蛋白进行酶切，之后再上镍柱纯化想要得到我的目的蛋白，结果目的蛋白并不流穿。我也做过一些改进方法，将柱材料减少一部分之后，目的蛋白会流传下来，但是仍然有部分还在柱子里，求助各位大神们有没有什么改进的方法啊。感谢感谢 发自小木虫Android客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
到新单位后，换了新的研究方向，没有团队，持续积累2区以上论文，能申请到面上吗
已经有7人回复
-
申请2026年博士
已经有5人回复
-
天津工业大学郑柳春团队欢迎化学化工、高分子化学或有机合成方向的博士生和硕士生加入
已经有5人回复
-
寻求一种能扛住强氧化性腐蚀性的容器密封件
已经有6人回复
-
2025冷门绝学什么时候出结果
已经有7人回复
-
请问有评职称，把科研教学业绩算分排序的高校吗
已经有6人回复
-
Bioresource Technology期刊，第一次返修的时候被退回好几次了
已经有7人回复
-
请问哪里可以有青B申请的本子可以借鉴一下。
已经有4人回复
-
请问下大家为什么这个铃木偶联几乎不反应呢
已经有5人回复
-
康复大学泰山学者周祺惠团队招收博士研究生
已经有6人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
sannny
新虫 (正式写手)
- 应助: 12 (小学生)
- 金币: 1218.5
- 散金: 138
- 红花: 5
- 帖子: 390
- 在线: 14.8小时
- 虫号: 3153638
- 注册: 2014-04-21
- 专业: 蛋白质组学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
|
样品里面加5-25mM咪唑。或者用25mM咪唑进行洗脱，可以把目的蛋白洗下来。很多氨基酸都会和镍结合的，只是结合强度没有六个连续组氨酸那么强，这也是镍柱纯化通常纯度较差的原因。 发自小木虫Android客户端 |
2楼2019-07-27 07:32:26
3楼2019-07-27 14:05:34
cloveseven
银虫 (初入文坛)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 232.6
- 红花: 1
- 帖子: 24
- 在线: 58.7小时
- 虫号: 3085537
- 注册: 2014-03-24
- 专业: 生物大分子结构与功能
4楼2019-10-11 22:52:23
ECUST_CAPF
铜虫 (小有名气)
- 应助: 7 (幼儿园)
- 金币: 587.8
- 帖子: 241
- 在线: 27.4小时
- 虫号: 21351119
- 注册: 2020-03-04
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
5楼2020-03-12 14:26:31
6楼2024-01-05 10:26:53