24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
查看: 972  |  回复: 3

feobenan

新虫 (初入文坛)

[求助] 分光光度计测荧光时 荧光染料与DNA用量关系

目前在做一个化合物与小牛胸腺dna反应的荧光光谱,选的荧光染料是dapi,用的染料浓度是说明书建议的最低浓度0.5μg/ml,dna的浓度是0.005mg/ml,体系体积为3ml 。先测的dna+dapi  1h之后的荧光强度a,再测加后化合物1h后的荧光强度b1、b2、b3、b4,但总是b1>b2>a>b3>b4,也就是加化合物后荧光总是先增高再降低,但感觉先升高是不合理的,之前怀疑是反应时间不够,已被排除,现在考虑是染料没有把dna上的位点结合完全,所以考虑到它们俩的用量比,dna和染料是否存在一个用量关系?不知有没有做过这方面实验的前辈,望指点迷津,谢谢。@biostar2009
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ChromaTech

新虫 (初入文坛)

★ ★
西门吹雪170: 金币+2, 鼓励回帖交流 2019-07-30 22:05:26
DAPI是嵌入到DNA双链里面的,随着DAPI量的增多,荧光会越强。但DNA浓度一定的情况下,会有一个饱和的染料浓度。

建议先做个滴定实验
2楼2019-07-30 08:55:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feobenan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ChromaTech at 2019-07-30 08:55:39
DAPI是嵌入到DNA双链里面的,随着DAPI量的增多,荧光会越强。但DNA浓度一定的情况下,会有一个饱和的染料浓度。

建议先做个滴定实验

谢谢,去试试

发自小木虫Android客户端
3楼2019-08-12 11:11:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feobenan

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ChromaTech at 2019-07-30 08:55:39
DAPI是嵌入到DNA双链里面的,随着DAPI量的增多,荧光会越强。但DNA浓度一定的情况下,会有一个饱和的染料浓度。

建议先做个滴定实验

请问有没有已知的能使DAPI 和DNA的荧光猝灭的物质?想做一个阳性对照

发自小木虫Android客户端
4楼2019-08-12 11:18:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 feobenan 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 284求调剂 +20 让我上岸吧阿西 2026-04-09 20/1000 2026-04-15 14:40 by 黑科技花岗岩
[考研] 一志愿沪9,生物学326求调剂 +4 刘墨墨 2026-04-15 4/200 2026-04-15 14:34 by woshi0655
[考研] 求调剂 +9 小聂爱学习 2026-04-11 13/650 2026-04-14 19:18 by Art1977
[考研] 材料专业344求调剂 +17 hualkop 2026-04-10 22/1100 2026-04-14 16:21 by sxdj2
[考研] 求调剂 +20 MAX怅惘 2026-04-09 22/1100 2026-04-14 14:57 by 独醉梦孤城
[考研] 机械工程313分找工科调剂 +4 双一流本科机械 2026-04-08 4/200 2026-04-14 07:32 by Abskk
[考研] 本科西工大 324求调剂 +5 wysyjs25 2026-04-10 5/250 2026-04-13 23:08 by pies112
[考研] B区0809 ,数一英一,290 求调剂 +3 泠潍1111 2026-04-12 4/200 2026-04-13 20:35 by 学员JpLReM
[考研] 一志愿西交机械专硕求调剂 +9 求上岸的小王 2026-04-10 9/450 2026-04-13 16:08 by jiangguiquan11
[考研] 一志愿厦大生物学332求调剂 +11 池池池池池池 2026-04-08 11/550 2026-04-13 14:10 by 科研论
[考研] 0831一轮调剂失败求助 +10 小熊睿睿_s 2026-04-11 10/500 2026-04-12 22:43 by 长弓傲
[考研] 22408 352分求调剂 +5 努力的夏末 2026-04-09 5/250 2026-04-12 19:17 by wj165256
[考研] 326求调剂 +6 Shansyn 2026-04-10 6/300 2026-04-12 09:46 by hammer3
[考研] 331求调剂 +5 王国帅 2026-04-11 5/250 2026-04-11 22:56 by 溪涧流水
[考研] 343求调剂 +9 王国帅 2026-04-10 9/450 2026-04-11 20:31 by dongdian1
[考研] 22408 352分求调剂0854类 +4 努力的夏末 2026-04-09 4/200 2026-04-11 09:57 by zhq0425
[考研] 342电子信息专硕求调剂 +9 你让我怎么荔枝 2026-04-10 10/500 2026-04-11 08:33 by zhq0425
[考研] 中科院总分315求调剂 +8 lallalh 2026-04-09 8/400 2026-04-10 19:30 by dick_runner
[考研] 求调剂 材料与工程 324分 专硕 +19 翩翩一书生 2026-04-10 21/1050 2026-04-10 11:41 by wp06
[考研] 本科西工大 0856 324求调剂 +10 wysyjs25 2026-04-09 11/550 2026-04-10 08:37 by 5268321
信息提示
请填处理意见