| 查看: 1994 | 回复: 6 | |||
[交流]
胶回收后测序提示有高级结构
|
|
对PCR凝胶电泳使用天根生物试剂盒进行胶回收，回收后送去测序，结果显示双链有高级结构，一共测序4个样，3个样双链有高级结构，一个单链有高级结构。之前不做胶回收直接将pcr样品测序，从来没有出现过这个情况。请问是不是胶回收过程导致这个结果，哪个步骤容易出现dna结构变化 发自小木虫IOS客户端 |
回复此楼» 猜你喜欢
湖北师范大学招调剂啦
已经有9人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有91人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
化工申博
已经有3人回复
-
申博自荐
已经有2人回复
-
广西民族大学化学化工学院化学工程与技术学硕，材料化工专硕调剂名额充足！
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
2楼2019-07-22 12:51:27
longyueling
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 472.8
- 散金: 100
- 帖子: 124
- 在线: 5.7小时
- 虫号: 3775830
- 注册: 2015-03-30
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
3楼2019-08-07 16:30:40
|
最近又进行了两次实验，胶回收之后跑电泳条带很亮位置也正常，送样测序后显示27 F的单链全是高级结构，怀疑是不是引物的问题，如果引物稀释没有使用新打的去离子水，会有这么大的影响吗？另外引物干粉有可能超过1年了，但是反向引物也是同时合成的呀，为什么反向的测序结果正常呢，焦头烂额中，还望您不吝赐教，谢谢。另外我们PCR的体系是50微升的，从电泳条带亮度看这个量回收得到的产物浓度没有问题 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2019-08-19 11:37:09
5楼2019-08-19 13:06:34
longyueling
新虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 472.8
- 散金: 100
- 帖子: 124
- 在线: 5.7小时
- 虫号: 3775830
- 注册: 2015-03-30
- 性别: MM
- 专业: 生物化学
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
|
之前测序正常的时候用的引物也是你们自己合成的？那就不是引物设计的问题，你既然怀疑了就再稀释一次测序看看结果验证一下。有的时候公司测序出现该问题确实会重新稀释引物 发自小木虫Android客户端 |
6楼2019-08-19 22:27:43
7楼2019-10-10 09:34:18
