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爽咪

银虫 (初入文坛)

[求助] 求助醋酸菌菌落PCR已有1人参与

分子生物学新手,请各位大神指教指教,验证质粒是否稳定存在于醋酸菌中,做过几次菌落PCR均未成功,希望能得到高人指点。
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爽咪

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by biosci at 2019-07-12 17:09:32
可以稳定存在,看你有什么载体了

是我师兄之前导入的一个质粒,它们能在抗性平板上生长,但是菌落PCR始终提不出来,我也试了直接用试剂盒提质粒,提质粒也失败了,不知道哪里出问题了。
4楼2019-07-13 09:38:37
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biosci

捐助贵宾 (职业作家)


可以稳定存在,看你有什么载体了

发自小木虫Android客户端
2楼2019-07-12 17:09:32
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丹朱楚晴

新虫 (初入文坛)


西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2019-07-14 22:07:58
预变性时间延长,有利于细胞壁的破碎,可提高准确率

发自小木虫Android客户端
3楼2019-07-12 21:10:06
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爽咪

银虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 丹朱楚晴 at 2019-07-12 21:10:06
预变性时间延长,有利于细胞壁的破碎,可提高准确率

我有查一些资料,先对菌液99℃加热10 min,再进行菌落PCR,但是我还是失败了,这个感觉和你说的很像,破碎细胞壁。
5楼2019-07-13 09:43:16
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