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iceneo1983银虫 (小有名气)
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请教大家一个免疫沉淀的问题
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我最近在做免疫沉淀中出现了这样的现象,我用细胞裂解液作为抗原,其中含有大约2mg总蛋白,我加了5微升的多克隆抗血清作为抗体,过夜结合后,用ProteinA的珠子沉淀抗原。检测时发现没有相应的抗原被沉淀下来,电泳检测ProteinA吸附后的细胞裂解液发现其中抗原仍然存在,而且没有抗体的重链的条带,也就是说ProteinA的珠子可以吸附抗体,珠子是没有问题的。 想请教一下有经验的同学,这是不是因为我的抗体用量不够而导致没有沉淀下来目的抗原呢? |
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