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icicle_me

铜虫 (初入文坛)

[交流] 求助:DGGE电泳出孔问题

电泳的结果很奇怪,怎么出孔后就跑不动了,DNA都集中在靠近上样孔的位置,溴酚蓝的位置也比较靠上。70V,17h,应该已经分开才对啊。

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-5 at 21:01 ]
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afoost

铜虫 (初入文坛)

浓缩胶没有发挥作用啊,是不是配的有问题
2楼2009-05-26 17:07:03
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icicle_me

铜虫 (初入文坛)

可我只配了一层胶
3楼2009-05-26 17:58:18
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Shengjing

铁虫 (初入文坛)

★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流! 6-8 21:49
你加了多少的10%APS 和 TEMED?
我以前有过类似的一个胶,是因为我加了太多了TEMED and 10% APS.这样胶里形成的孔太小,让DNA片段无法通过。
还有就是check 一下电流。如果电流特别小也是个问题。每次check 一个在一定电压下电流该是多少。不过你跑一个胶或2个胶电流会不一样。我一般都是在load sample之前先check 一下电流,如果查不多的话,就跑。
4楼2009-05-31 09:22:45
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novaoy

金虫 (小有名气)

感觉是电路的问题
哼哼哈兮
5楼2009-06-08 21:45:53
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2008116068

木虫 (著名写手)

我觉得是胶的浓度高了
只要踮起脚尖,就离太阳更近一点!!!
6楼2009-06-08 22:47:59
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guoyon

银虫 (小有名气)

你的片段多大啊?
7楼2009-07-05 09:28:04
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haichang

银虫 (小有名气)

我做DGGE最顶层点样孔处都是非变性胶  可以检查一下非变性胶】
再就是PCR过程  如果没有P好的话 也容易出问题
我觉得DGGE就是P的过程和配胶的过程最关键
时不我待
8楼2009-07-05 17:07:06
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