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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 求助：DGGE电泳出孔问题
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icicle_me

铜虫 (初入文坛)

[交流] 求助：DGGE电泳出孔问题

电泳的结果很奇怪，怎么出孔后就跑不动了，DNA都集中在靠近上样孔的位置，溴酚蓝的位置也比较靠上。70V，17h，应该已经分开才对啊。

[ Last edited by 350784478 on 2009-8-5 at 21:01 ]
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1楼 2009-05-26 13:37:23
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afoost

铜虫 (初入文坛)
浓缩胶没有发挥作用啊，是不是配的有问题
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2楼2009-05-26 17:07:03
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icicle_me

铜虫 (初入文坛)
可我只配了一层胶
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3楼2009-05-26 17:58:18
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Shengjing

铁虫 (初入文坛)
★ ★
amisking(金币+2,VIP+0):欢迎发帖交流！ 6-8 21:49
你加了多少的10%APS 和 TEMED?
我以前有过类似的一个胶，是因为我加了太多了TEMED and 10% APS.这样胶里形成的孔太小，让DNA片段无法通过。
还有就是check 一下电流。如果电流特别小也是个问题。每次check 一个在一定电压下电流该是多少。不过你跑一个胶或2个胶电流会不一样。我一般都是在load sample之前先check 一下电流，如果查不多的话，就跑。
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4楼2009-05-31 09:22:45
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novaoy

金虫 (小有名气)
感觉是电路的问题
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哼哼哈兮
5楼2009-06-08 21:45:53
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2008116068

木虫 (著名写手)
我觉得是胶的浓度高了
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只要踮起脚尖，就离太阳更近一点！！！
6楼2009-06-08 22:47:59
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guoyon

银虫 (小有名气)
你的片段多大啊？
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7楼2009-07-05 09:28:04
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haichang

银虫 (小有名气)
我做DGGE最顶层点样孔处都是非变性胶  可以检查一下非变性胶】
再就是PCR过程  如果没有P好的话 也容易出问题
我觉得DGGE就是P的过程和配胶的过程最关键
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时不我待
8楼2009-07-05 17:07:06
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