应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 求助酵母菌落PCR方法
81/1返回列表
查看: 4288  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

ELIiO

铁虫 (小有名气)

[求助] 求助酵母菌落PCR方法 已有4人参与

刚开始接触分子生物学，想请教一下各位大佬关于酵母菌落PCR的方法，目前尝试了沸水浴和裂解液，都没有结果。请问各位还有没有什么其他的方法了呢。感谢

@biostar2009 @飞约疯人院 发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2019-07-03 08:33:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Forest666

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
推荐你看下这篇文章，我原来用过这个方法的，可以鉴定出来。
武可婧, 吕一鸣, 李晶博, et al. 一种高效快速鉴定酵母转化子的酵母菌落PCR方法[J]. 生物技术通报, 2013(12):137-140.
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

ELIiO
ATGC
2楼2019-07-03 08:35:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

渊博震天

版主 (职业作家)

Yeast Display

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
建议你挑个单菌落到相应1ml培养基培养10h，随后取 30ul 10mm naoh溶液于10ul菌液中100℃煮沸10min即可。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

ELIiO
3楼2019-07-03 09:58:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ELIiO

铁虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by Forest666 at 2019-07-03 08:35:16
推荐你看下这篇文章，我原来用过这个方法的，可以鉴定出来。
武可婧, 吕一鸣, 李晶博, et al. 一种高效快速鉴定酵母转化子的酵母菌落PCR方法. 生物技术通报, 2013(12):137-140.

好的好的  谢谢

发自小木虫Android客户端
回复此楼
4楼2019-07-03 11:56:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ELIiO

铁虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 渊博震天 at 2019-07-03 09:58:39
建议你挑个单菌落到相应1ml培养基培养10h，随后取 30ul 10mm naoh溶液于10ul菌液中100℃煮沸10min即可。

好的  我试试  谢谢啦

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2019-07-03 11:57:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

sannny

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主，液氮，沸水两三个循环，绝对可以。酵母直接菌落PCR存在的一个主要问题是模板对扩增的干扰。所以你不管用什么方法破菌，都记得稀释至少20倍作为模板，否则任何条带都不会有。这是最关键的，破菌方式真不重要，不管用什么方式，总可以破一部分的，对PCR来说都是够的。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2019-07-03 12:16:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biosci

捐助贵宾 (知名作家)
菌体越少，扩增的越好。

发自小木虫Android客户端
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2019-07-03 13:17:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

有个林夕

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
8楼2019-07-03 14:09:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ELIiO 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 娱乐 +4 Tide man 2026-08-03 4/200 2026-08-04 11:51 by wgch518
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +5 Tide man 2026-08-04 8/400 2026-08-04 11:43 by everxc
[找工作] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-03 6/300 2026-08-04 11:36 by MWRYsWbJw4DE
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-03 6/300 2026-08-04 11:34 by MWRYsWbJw4DE
[教师之家] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-03 7/350 2026-08-04 11:31 by MWRYsWbJw4DE
[博后之家] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 Ocx3OKOzGU4q 2026-08-03 4/200 2026-08-04 11:26 by MWRYsWbJw4DE
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 f1dmPx051StA 2026-08-03 7/350 2026-08-04 09:31 by v1TJC4qJauAB
[博后之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jRl3mE6ddZGq 2026-08-03 5/250 2026-08-04 09:27 by v1TJC4qJauAB
[基金申请] 系统今天又提示维护了，估计离放榜不远了 +12 winnerche 2026-07-29 16/800 2026-08-04 08:18 by Equinoxhua
[有机交流] 一个有机合成实验室都需要哪些设备？ 50+3 kf2781974 2026-07-31 10/500 2026-08-04 08:05 by 88817753
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 13/650 2026-08-04 07:30 by k7OM8YghWbkC
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 6/300 2026-08-04 06:10 by k7OM8YghWbkC
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 7/350 2026-08-04 04:46 by k7OM8YghWbkC
[考研] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 cu9Nq1xK233Z 2026-08-03 8/400 2026-08-04 03:21 by k7OM8YghWbkC
[基金申请] 什么时候能放榜呀？ +3 Jacob678 2026-08-03 3/150 2026-08-03 16:14 by gltch
[基金申请] 面上再次挂了，太难了，躺也躺不了，倦也卷不过，小学校之殇！ +19 低垂的野花 2026-07-31 25/1250 2026-08-03 09:25 by gy116024
[基金申请] 2026年国自然面上资助率 +16 布布和一二 2026-07-30 22/1100 2026-08-03 09:20 by gy116024
[基金申请] 微信指数没变化，科研之友没阅读 +15 wangze12014 2026-07-28 19/950 2026-08-02 20:05 by 蔡棒棒菂
[考博] 2027年申博 50+3 射雕英雄胜 2026-07-30 3/150 2026-08-02 09:36 by lfy8008
[高分子] HXDI做水性聚氨酯乳液，是不是特别容易出渣 15+3 yuyusuv 2026-07-29 3/150 2026-07-31 09:21 by huizingga
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭