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求助酵母菌落PCR方法 已有4人参与
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刚开始接触分子生物学，想请教一下各位大佬关于酵母菌落PCR的方法，目前尝试了沸水浴和裂解液，都没有结果。请问各位还有没有什么其他的方法了呢。感谢 @biostar2009 @飞约疯人院 发自小木虫Android客户端 |
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ELIiO
2楼2019-07-03 08:35:16
渊博震天
版主 (职业作家)
Yeast Display
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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建议你挑个单菌落到相应1ml培养基培养10h，随后取 30ul 10mm naoh溶液于10ul菌液中100℃煮沸10min即可。 发自小木虫Android客户端 |
» 本帖已获得的红花（最新10朵）
3楼2019-07-03 09:58:39
4楼2019-07-03 11:56:49
5楼2019-07-03 11:57:30
sannny
新虫 (正式写手)
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- 专业: 蛋白质组学
【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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楼主，液氮，沸水两三个循环，绝对可以。酵母直接菌落PCR存在的一个主要问题是模板对扩增的干扰。所以你不管用什么方法破菌，都记得稀释至少20倍作为模板，否则任何条带都不会有。这是最关键的，破菌方式真不重要，不管用什么方式，总可以破一部分的，对PCR来说都是够的。 发自小木虫Android客户端 |
6楼2019-07-03 12:16:49
7楼2019-07-03 13:17:41
感谢参与，应助指数 +1
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本帖内容被屏蔽 |
8楼2019-07-03 14:09:47