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Mayprincess新虫 (初入文坛)
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[求助]
植物组织免疫组化实验求助 已有1人参与
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请教各位虫友一些关于免疫组化的问题。我的实验过程中样品自发荧光很强，导致我无法确定目标抗原到底有没有与抗体结合。 我的材料是花药，想定位花粉壁上的果胶位置。用的FAA固定的石蜡切片。按照常规的IHC的方法，脱蜡—复水—微波抗原修复—过氧化氢灭活—牛血清蛋白背景封闭—一抗二抗孵育—抗荧光淬灭剂封片。每个过程都有用PBS洗了，但是在上机观察发现空白对照组和处理组都有很强的荧光，而且荧光强度差不多。然后我又用脱完蜡未经处理的片子看也有很强的荧光，荧光强度也和前两个差不多。所以我认为这是自发荧光，并推测处理组的目标抗原并未与抗体结合，否则其荧光强度应该比另外两个对照组强。请教各位虫友，有什么方法可以消除自发荧光？ @gyesang @hc-material 发自小木虫Android客户端 |
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Mayprincess
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