应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 分光光度法测菌体浓度
131/2返回列表12下一页
查看: 4820  |  回复: 12
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Albert冰辰

新虫 (小有名气)

[求助] 分光光度法测菌体浓度 已有3人参与

请问一下，我培养了一瓶细菌，需要每天测OD值绘制生长曲线。由于我菌液比较少，为了尽量减少测量OD值时取用菌液的损失对实验的干扰，我选择了每次少量选取、进行稀释后再测定的方法。但我今天尝试了一下，我将菌液用刚配置好的培养基稀释了十倍，然后以刚配置好的培养基作为参比，但得出来的OD值很小很小！有几个还是负数！！请问这是什么原因呢？是因为菌液浓度太稀了吗？另外，这种稀释后再测OD的方法，是不是应该用培养基去稀释呢？参比应该用培养基吗？另外，用来稀释的培养基和作为参比的培养基要不要灭菌呢？还有就是我在测定的时候，比色皿并没有润洗，请问这样的误差大吗？

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2019-06-26 04:07:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

下一页、空白

金虫 (正式写手)
稀释液和参比液只要是一样的就可以，稀释倍数不要太大，让检测值保持在0.2-0.8，同时多做几瓶做平行，做镜检看有没有菌，在培养初期OD值很小，不适合稀释检测。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2019-06-26 09:33:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

魅力火锅19

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
2楼2019-06-26 07:13:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小乖兔

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用小体积比色皿，少量菌液就可以测OD了，前期不要稀释，等到培养到后期菌液很浑浊OD很高了才需要稀释。
赞一下(1人) 回复此楼
6楼2019-06-26 17:25:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

xinxiyuzhou

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
参比是用培养基调零。不知道你的比色皿是否是小体积的，我们先前的实验室专门做生长曲线的比色皿是50-100微升的样品就可以测量。如果你需要的样品测量的体积大，可以用50 ml的三角瓶来摇菌 (培养20-30ml的菌液）。参比的培养基和稀释的瓶培养基都要灭菌的。我们以前做的时候做不过是加了甲醛对细菌进行灭活后再测的，测之前涡旋或者吹打混匀。最好不要稀释吧，尤其是在刚接种时（lag phase）。
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

Albert冰辰
4楼2019-06-26 15:11:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

青橙子皮

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
5楼2019-06-26 16:22:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Albert冰辰

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 魅力火锅19 at 2019-06-26 07:13:46
培养皿清洗干净；测量时间差会有影响，菌会沉降；离心是否有菌体？可以用蒸馏水洗涤再参比来测

每次测之前都摇匀了的，我们是把菌液先加到离心管里面，然后加培养液稀释，然后摇匀再加到比色皿里面的。谢谢啦！

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
7楼2019-07-05 19:43:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Albert冰辰

新虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 下一页、空白 at 2019-06-26 09:33:02
稀释液和参比液只要是一样的就可以，稀释倍数不要太大，让检测值保持在0.2-0.8，同时多做几瓶做平行，做镜检看有没有菌，在培养初期OD值很小，不适合稀释检测。

非常感谢！我们后面镜检了一下，的确是有菌的，不过密度比较低。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
8楼2019-07-05 19:44:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Albert冰辰

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
4楼: Originally posted by xinxiyuzhou at 2019-06-26 15:11:05
参比是用培养基调零。不知道你的比色皿是否是小体积的，我们先前的实验室专门做生长曲线的比色皿是50-100微升的样品就可以测量。如果你需要的样品测量的体积大，可以用50 ml的三角瓶来摇菌 (培养20-30ml的菌液）。参 ...

非常感谢您的建议！我们最开始也有考虑用小规格的比色皿，但担心小规格的比色皿不好清洗，能请问一下你们清洗小规格的比色皿的具体方法吗？我们现在用的3.5ml的比色皿，清洗起来都很耗时间，一个人测OD，两个人清洗都来不及！

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
9楼2019-07-05 19:47:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我喜欢吃桃

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 青橙子皮 at 2019-06-26 16:22:19
是不是比色皿用错了呀？我之前也测过是负数就是比色皿用错了。

比色皿应该怎么用呀？我测出来也是负数
赞一下 回复此楼
10楼2019-08-11 17:30:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Albert冰辰 的主题更新
131/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 xx7gd5zq4e 2026-05-15 6/300 2026-05-16 22:25 by lindoudou
[高分子] 本人最近太闲了，谁有问题可以提，每天会统一回复 +9 一切都是空工 2026-05-12 20/1000 2026-05-16 19:52 by Equinoxhua
[基金申请] 重磅！青年科学基金项目（C类）资助增幅预计超过50% +6 水和泥不是水泥 2026-05-13 8/400 2026-05-16 19:50 by Equinoxhua
[有机交流] 求助2，4-二氯-5-嘧啶甲醛的合成方法 20+3 光吃不拉 2026-05-14 6/300 2026-05-16 19:46 by Equinoxhua
[基金申请] 精华III:  评审感受-评审感受-评审感受 +15 ferrarichen 2026-05-11 19/950 2026-05-16 19:44 by Equinoxhua
[找工作] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 ky2p12rrjj 2026-05-15 3/150 2026-05-16 18:35 by j6b2pdz07o
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 x0mp7owy2b 2026-05-15 4/200 2026-05-16 17:45 by j6b2pdz07o
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 v9tggjlwd0 2026-05-15 3/150 2026-05-16 17:37 by j6b2pdz07o
[有机交流] 求有机合成大神指点三硫酸乙烯酯（CAS：2793408-99-6）的合成路线 30+3 Leekmid 2026-05-13 10/500 2026-05-16 16:37 by czyzsu
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +5 cjf4bx70cj 2026-05-14 6/300 2026-05-16 16:17 by 0i5p09z61n
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 k37jurhrau 2026-05-16 3/150 2026-05-16 13:57 by vcdazktkjx
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 l7k6xnh0yc 2026-05-14 6/300 2026-05-16 11:29 by h3oerqvkv9
[硕博家园] 申请博士 +3 呃?呃 2026-05-15 3/150 2026-05-16 11:01 by a4742549
[文学芳草园] 裁员滚滚，退居二线 +4 J_wei 2026-05-10 4/200 2026-05-16 10:52 by zh10246
[考博] 2026博士还有哪些学校有名额 +5 小王求读研 2026-05-15 6/300 2026-05-16 10:44 by a4742549
[基金申请] 这年头没有找到涵评专家，还有中面上的可能吗 +11 dd921ww 2026-05-12 13/650 2026-05-16 09:16 by Howard28
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.5.5.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +4 l7k6xnh0yc 2026-05-14 5/250 2026-05-16 04:29 by k37jurhrau
[考博] 西南大学考核制博士 +4 lijunjie84 2026-05-11 7/350 2026-05-15 23:20 by 同仁堂教主
[文学芳草园] 风把牡丹吹跑了 +5 myrtle 2026-05-12 9/450 2026-05-15 15:27 by myrtle
[教师之家] 教学课件你会给同学吗 +8 硕士研究生吗 2026-05-13 8/400 2026-05-14 22:23 by 常规沥青
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭