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wwxxxin

铜虫 (初入文坛)

[求助] 氨氧化细菌pcr已有1人参与

氨氧化细菌用aomA1F-amoA2R总是p不出来,弥散状。已确定模板,酶,体系没有问题(同样的样品,酶,体系,Arch amoA可以扩增出来),参考过(Li-Mei Zhang 2010)的Touchdown反应程序。退火温度梯度50-60度也设置过。问题还有可能出现在哪里?
CTO189f-CTO654r(KOWALCHUK,G. A.  1997)可以做氨氧化细菌的引物吗?是否会好一些?
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kshdd

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

那就是最后一种可能:你的引物跟你的菌对不上,换引物吧
6楼2019-06-04 10:13:55
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kshdd

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
8楼: Originally posted by wwxxxin at 2019-06-05 06:57:54
不会的,样品是土壤的总DNA。
...

有可能的,我之前的样品的养殖水体也是P不出来,最后换的引物。

引物那么多,别跟它较劲,换一对海阔天空啊
10楼2019-06-05 15:03:12
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