| 查看: 1855 | 回复: 8 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
反对派银虫 (正式写手)
|
[交流]
线型空质粒被双酶切时，为何没有看到两条带？ 已有3人参与
|
||
|
各位同仁都知道抽提空质粒的时候，通常含有三种构型：超螺旋、线型和单链开环。 我的疑问是： 1.为何线型的质粒，在利用多克隆位点内的酶单酶切或者双酶切时，为何没有看到两条带？ 2.线型质粒转化感受态细胞会不会长出抗性菌落。 3.抽提质粒时每次产生线性质粒的断裂位点是不是固定的？ |
回复此楼» 猜你喜欢
不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇”
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有163人回复
-
蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千”
已经有0人回复
-
不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI”
已经有0人回复
-
纳米粒度分析
已经有3人回复
-
林科院林化所招收材料与化工专业硕士，坐标南京
已经有0人回复
反对派
银虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 2228.1
- 散金: 50
- 红花: 5
- 帖子: 495
- 在线: 216.6小时
- 虫号: 1889311
- 注册: 2012-07-12
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
4楼2019-05-31 08:33:51
反对派
银虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 2228.1
- 散金: 50
- 红花: 5
- 帖子: 495
- 在线: 216.6小时
- 虫号: 1889311
- 注册: 2012-07-12
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
2楼2019-05-28 08:39:08
★ ★
反对派: 金币+2, 谢谢您的回复。 2019-05-31 08:24:32
反对派: 金币+2, 谢谢您的回复。 2019-05-31 08:24:32
|
各位同仁都知道抽提空质粒的时候，通常含有三种构型：超螺旋、线型和单链开环。 我的疑问是： 1.为何线型的质粒，在利用多克隆位点内的酶单酶切或者双酶切时，为何没有看到两条带？ 答：用质粒提取试剂盒一般能看到超螺旋（90%）、线型（5%）和单链开环（15%），数据只是个大概，可能有偏差，一般超螺旋的会占绝大部分；酶切后，双链都开的情况浓度很低，电泳的时候观察不到。 2.线型质粒转化感受态细胞会不会长出抗性菌落。 答：转化普通的大肠杆菌不会长菌落，一般酶切不干净（即使胶回纯化等）也会长少量菌落，这个是正常现象 3.抽提质粒时每次产生线性质粒的断裂位点是不是固定的？ 答：不是固定的，随机；比例少，可以忽略 |
3楼2019-05-29 10:40:55
反对派
银虫 (正式写手)
- 应助: 4 (幼儿园)
- 金币: 2228.1
- 散金: 50
- 红花: 5
- 帖子: 495
- 在线: 216.6小时
- 虫号: 1889311
- 注册: 2012-07-12
- 专业: 生物物理、生物化学与分子
5楼2019-06-01 09:41:32
