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零下8°新虫 (小有名气)
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骨片免疫组化为什么脱蜡总是脱不干净!已有1人参与
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亲爱的虫友们,我在做骨片的时候,免疫组化总是脱蜡脱不干净,不论是免疫组化还是免疫荧光显微镜下都是蜡,抗体根本没法结合,我尝试了在二甲苯,一天,两天,一个星期,两个星期,二甲苯里水浴加热两周,一个月,都不能把蜡脱干净,前期我已经在烘箱将骨片烘烤四到六小时了,温度大概55-60°。求大神不吝赐教!! 发自小木虫IOS客户端 |
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你所谓的骨片是否跟我们常用的HE或者免疫组化切片3-5微米厚度?如果是,你首先检查或者换新的二甲苯!!!其次,这个烤片的温度一般60℃不能说55,大概不行,买个温度对着烤箱顶部的孔或者直接放进去把温度一定调好,一般烤片1-2小时就可以,太久也不好。第三,二甲苯要2缸每缸时间要10分钟左右,太短都不行。最后,二甲苯出来你的下行(浓度梯度递减)酒精浓度时间有问题吗?拍几张图片看看,更容易知道可能你的问题在哪里。 发自小木虫Android客户端 |

3楼2019-05-26 07:05:42
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2楼2019-05-24 22:05:52
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非常感谢您的指导,是这样的,我们的骨片是脱钙脱水包埋,然后就是切片,大概也就是3-5mm,我每次做的时候都是用的新的二甲苯,新的酒精,酒精也是按照浓度梯度来的,因为实验室的烘箱温度无法进行精确控制,所以我说成55~60°,,我们医院的病理科给我们切的片子,他们给我做了几张HE染色片子,可以看到骨片的细胞,但是免疫组化,荧光抗体无法结合! 发自小木虫IOS客户端 |
4楼2019-05-26 08:30:27













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