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零下8°

新虫 (小有名气)

[交流] 骨片免疫组化为什么脱蜡总是脱不干净! 已有1人参与

亲爱的虫友们,我在做骨片的时候,免疫组化总是脱蜡脱不干净,不论是免疫组化还是免疫荧光显微镜下都是蜡,抗体根本没法结合,我尝试了在二甲苯,一天,两天,一个星期,两个星期,二甲苯里水浴加热两周,一个月,都不能把蜡脱干净,前期我已经在烘箱将骨片烘烤四到六小时了,温度大概55-60°。求大神不吝赐教!!

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whitewave

至尊木虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你所谓的骨片是否跟我们常用的HE或者免疫组化切片3-5微米厚度?如果是,你首先检查或者换新的二甲苯!!!其次,这个烤片的温度一般60℃不能说55,大概不行,买个温度对着烤箱顶部的孔或者直接放进去把温度一定调好,一般烤片1-2小时就可以,太久也不好。第三,二甲苯要2缸每缸时间要10分钟左右,太短都不行。最后,二甲苯出来你的下行(浓度梯度递减)酒精浓度时间有问题吗?拍几张图片看看,更容易知道可能你的问题在哪里。

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天生我才
3楼2019-05-26 07:05:42
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