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杨锡369

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by zhz0809 at 2019-05-17 10:25:16
1.建议涂板50ug/ml Kan+50ug/ml Rif(GV3101 EHA105 AHL1 LBA4404,其它农杆菌按说明书添加)  单独的Kan 会长少量杂菌(我们的经验全涂<10个斑),如果你的板子长了接近1000个,肯定是转进去了
2.农杆菌菌落 ...

难道是我的感受态细胞制备的有问题吗?虫友,你有好的感受态细胞制备方法可以分享给我吗
11楼2019-05-17 18:35:09
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杨锡369

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
9楼: Originally posted by zhz0809 at 2019-05-17 10:25:16
1.建议涂板50ug/ml Kan+50ug/ml Rif(GV3101 EHA105 AHL1 LBA4404,其它农杆菌按说明书添加)  单独的Kan 会长少量杂菌(我们的经验全涂<10个斑),如果你的板子长了接近1000个,肯定是转进去了
2.农杆菌菌落 ...

换了一个PCR酶,果然P出来了!

发自小木虫IOS客户端
12楼2019-05-17 22:08:56
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zhz0809

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
10楼: Originally posted by 杨锡369 at 2019-05-17 18:33:46
平板长接近1000个斑需要几天啊,我之前加只加kan抗生素,48h最多有20个单菌落。...

需要48h-60h左右,一般36h能看见克隆,48h能挑斑鉴定!

发自小木虫Android客户端
13楼2019-05-18 13:26:41
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冰絮208

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

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杨锡369: 金币+50, ★★★很有帮助 2019-05-28 21:15:11
引用回帖:
10楼: Originally posted by 杨锡369 at 2019-05-17 18:33:46
平板长接近1000个斑需要几天啊,我之前加只加kan抗生素,48h最多有20个单菌落。...

两个抗生素均添加,一般37℃过夜培养后,平板上就会出现不少菌落。挑取5-8单菌,加抗生素液体培养,然后进行PCR检测,阳性的你可以再用液体培养的涂个平板,估计能得到你想要的。
14楼2019-05-23 17:38:09
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