24小时热门版块排行榜    

查看: 3306  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

杨锡369

新虫 (小有名气)

[求助] 重组质粒导入农杆菌,菌落PCR假阳性该怎么处理 已有1人参与

我把重组好的质粒从大肠杆菌DH5α中抽提出来(重组质粒测序鉴定目的基因已经放进去了的),然后把抽提的质粒导入农杆菌感受态,在kan50抗性平板上28℃培养两天,挑单菌落做菌落PCR,怎么都P不出来。
请问各位小木虫遇到这种情况该怎么处理?怎么才能提升阳性率,降低假阳性?@gyesang
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

freehomefc

新虫 (小有名气)

农杆菌GV 3101的抗性是利福平,还有其他的农杆菌,我没用过不确定,你在用的时候可以搜索一下它对应的抗性

发自小木虫Android客户端
8楼2019-05-16 22:56:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

freehomefc

新虫 (小有名气)

你的抗生素用错了。你用的抗生素应该是农杆菌加重组载体的抗性,而不只是重组载体的抗性

发自小木虫Android客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2019-05-16 13:05:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杨锡369

新虫 (小有名气)

送红花一朵
杨锡369: 回帖置顶 2019-05-16 13:33:27
引用回帖:
2楼: Originally posted by freehomefc at 2019-05-16 13:05:11
你的抗生素用错了。你用的抗生素应该是农杆菌加重组载体的抗性,而不只是重组载体的抗性

有较高转化率的重组质粒导入农杆菌的转化方法推荐吗?
3楼2019-05-16 13:08:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杨锡369

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by freehomefc at 2019-05-16 13:05:11
你的抗生素用错了。你用的抗生素应该是农杆菌加重组载体的抗性,而不只是重组载体的抗性

为什么单抗不行,而要用双抗生素呢
4楼2019-05-16 13:13:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 哈尔滨工业大学韩晓军教授课题组招收2027年硕士推免生及博士研究生 +3 灯灯灯灯DDDD 2026-09-03 3/150 2026-09-03 21:22 by 科研皮皮猪
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 YLHlRHNwYkce 2026-09-02 8/400 2026-09-03 20:31 by jyNB2vrbdUpR
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 uFOAtb1CDngh 2026-09-02 9/450 2026-09-03 20:20 by jyNB2vrbdUpR
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 5/250 2026-09-03 20:09 by jyNB2vrbdUpR
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 9/450 2026-09-03 20:07 by jyNB2vrbdUpR
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 YLHlRHNwYkce 2026-09-02 8/400 2026-09-03 18:50 by jyNB2vrbdUpR
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 YLHlRHNwYkce 2026-09-02 11/550 2026-09-03 18:42 by jyNB2vrbdUpR
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 rFEsUBKXRll0 2026-09-02 6/300 2026-09-03 16:49 by T0rGB46095mJ
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 5/250 2026-09-03 16:38 by T0rGB46095mJ
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 10/500 2026-09-03 16:27 by T0rGB46095mJ
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +10 雨打竹帘 2026-08-30 14/700 2026-09-03 13:17 by qsd10086
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +8 gdd2018 2026-08-28 13/650 2026-09-03 06:22 by 羽毛枫f
[基金申请] 要骂人了,新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西,结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
信息提示
请填处理意见