24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 2932  |  回复: 13
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

杨锡369

新虫 (小有名气)

[求助] 重组质粒导入农杆菌,菌落PCR假阳性该怎么处理 已有1人参与

我把重组好的质粒从大肠杆菌DH5α中抽提出来(重组质粒测序鉴定目的基因已经放进去了的),然后把抽提的质粒导入农杆菌感受态,在kan50抗性平板上28℃培养两天,挑单菌落做菌落PCR,怎么都P不出来。
请问各位小木虫遇到这种情况该怎么处理?怎么才能提升阳性率,降低假阳性?@gyesang
回复此楼

» 猜你喜欢

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杨锡369

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by freehomefc at 2019-05-16 13:05:11
你的抗生素用错了。你用的抗生素应该是农杆菌加重组载体的抗性,而不只是重组载体的抗性

为什么单抗不行,而要用双抗生素呢
4楼2019-05-16 13:13:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 14 个回答

freehomefc

新虫 (小有名气)

你的抗生素用错了。你用的抗生素应该是农杆菌加重组载体的抗性,而不只是重组载体的抗性

发自小木虫Android客户端

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

2楼2019-05-16 13:05:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

杨锡369

新虫 (小有名气)

送红花一朵
杨锡369: 回帖置顶 2019-05-16 13:33:27
引用回帖:
2楼: Originally posted by freehomefc at 2019-05-16 13:05:11
你的抗生素用错了。你用的抗生素应该是农杆菌加重组载体的抗性,而不只是重组载体的抗性

有较高转化率的重组质粒导入农杆菌的转化方法推荐吗?
3楼2019-05-16 13:08:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

freehomefc

新虫 (小有名气)

双抗可以用来检测重组载体是否导入进农杆菌,单抗的即使没有转入也可以存活,双抗跟加保险

发自小木虫Android客户端
5楼2019-05-16 13:56:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿郑州大学,080500学硕,总分317分求调剂 +4 举个栗子oi 2026-03-24 5/250 2026-03-26 23:15 by 不吃魚的貓
[考研] 305求调剂 +4 哇卢卡库 2026-03-26 4/200 2026-03-26 20:58 by sanrepian
[考研] 271求调剂 +6 生如夏花… 2026-03-22 6/300 2026-03-26 16:48 by 张凯十八号
[硕博家园] 北京林业大学硕导招生广告 +5 kongweilin 2026-03-26 7/350 2026-03-26 14:37 by mapenggao
[考研] 290分调剂求助 +3 吉祥止止陈 2026-03-25 3/150 2026-03-25 19:58 by barlinike
[考研] 359求调剂 +3 王了个楠 2026-03-25 3/150 2026-03-25 12:50 by Dyhoer
[考研] 282求调剂 +3 wcq131415 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:16 by userper
[考研] 293求调剂 +7 加一一九 2026-03-24 7/350 2026-03-25 12:02 by userper
[考研] 一志愿吉林大学材料与化工303分求调剂 +4 为学666 2026-03-24 4/200 2026-03-25 11:27 by BruceLiu320
[考研] 食品专硕 一志愿双一流 328 +3 xiaom99 2026-03-21 4/200 2026-03-24 21:20 by lailaisimei
[考研] 300分,材料,求调剂,英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[考研] 求调剂 +5 林之夕 2026-03-24 5/250 2026-03-24 17:16 by dick_runner
[考研] 材料考研调剂生 +3 黄粱一梦千年 2026-03-24 3/150 2026-03-24 17:00 by barlinike
[考研] 277分求调剂,跨调材料 +3 考研调剂lxh 2026-03-24 3/150 2026-03-24 13:52 by JourneyLucky
[考研] 269求调剂 +4 我想读研11 2026-03-23 4/200 2026-03-23 21:25 by pswait
[论文投稿] 急发核心期刊论文 +3 贤达问津 2026-03-23 5/250 2026-03-23 17:13 by 妹子不好惹
[考研] 接收2026硕士调剂(学硕+专硕) +4 allen-yin 2026-03-23 6/300 2026-03-23 15:04 by 汪!?!
[考研] 求调剂院校信息 +6 CX 330 2026-03-21 6/300 2026-03-22 15:25 by 无懈可击111
[考研] 求调剂 +3 13341 2026-03-20 3/150 2026-03-21 18:28 by 学员8dgXkO
[考研] 南昌大学材料专硕311分求调剂 +6 77chaselx 2026-03-20 6/300 2026-03-21 07:24 by JourneyLucky
信息提示
请填处理意见