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木虫阿哲

新虫 (小有名气)

[求助] 蛋白低背景银染试的原理

我们最近在做的是SDS-PAGE电泳,用的试剂盒是生工的低背景银染试剂盒,但是试剂盒里只有实验步骤,想知道低背景银染的原理,百度不到太清晰的,求教各位大佬!

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天使zmx

新虫 (小有名气)

做过,大致是先跑电泳,电泳过程涉及的操作液都要非常纯,不能徒手操作带入杂质赃物,也要避开容器本身过脏,将跑完电泳的胶转入银染配套的反应液中,按指导手册操作,加入配套硝酸银溶液,然后一定要看着银染过程,胶和蛋白以及其他微小杂质(所以溶液和容器不能有杂质脏物,哪怕你徒手碰胶都能留个指纹印)都能被棕色沉淀附着,很灵敏,当你的蛋白已经被染上棕色沉淀且慢慢清晰后即可加入中止液,若是放着任反应,回来就是一整块棕色的胶。所以你可以理解它反应灵敏且会一直生成棕色物进行附着,需要看着染色过程,而普通SDS蛋白量要求高,亮蓝染色染再久基本也只是蛋白部分染色,

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2楼2019-05-19 23:17:39
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