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haierhailan501

木虫 (正式写手)

[交流] 求助:半抗原与BSA偶联

最近在做带羧基的半抗原与BSA偶联的实验,采用EDC/NHS进行偶联反应。简单来说,反应过程是这样的,一定量的带羧基的半抗原与DEC/NHS,加入DMF溶解,超声振荡1h之后,离心取上清液,缓慢加入到BSA的磷酸缓冲液中,在室温下超声搅拌,反应过夜之后用蒸馏水透析24h,换水六次。偶联产物用紫外表征。重复了两次,结果都不理想,BSA应该是没有偶联上。文献上的相关报道也很多,几乎都不一样。不知道各位虫友当中有没有做过相关方面的工作,能否指教一下,谢谢!

[ Last edited by haierhailan501 on 2009-5-20 at 18:10 ]
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无效神

金虫 (小有名气)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
这个比例不是确定的,在一定的范围之中都可以,并且还要具体问题具体分析
无所谓
7楼2009-05-27 11:27:48
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haierhailan501

木虫 (正式写手)

虫友们都没有做过这个方面的工作吗?期待各位的赐教。
2楼2009-05-22 08:31:19
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xkiso

银虫 (小有名气)

半抗原, 免疫原性低, BSA 是大分子免疫蛋白, 与之藕联, 可以提高半抗原的免疫原性, 在ELISA或其他免疫检测中更容易检测的到.
3楼2009-05-22 10:19:14
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dianaofyezi

金虫 (正式写手)

首先EDC只能在溶液pH约为5左右工作,你的半抗原应该是用DMF先溶解了之后再偶联。第二EDC是将氨基是羧基偶联了,如果你选择的EDC浓度不正确,若有多余的EDC存在很容易导致BSA的自联,所以偶联比例是比较重要的。
52187644
4楼2009-05-22 11:18:19
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