应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 反转录
41/1返回列表
查看: 1141  |  回复: 3
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

盖螃蟹

新虫 (初入文坛)

[交流] 反转录 已有3人参与

真菌总rna用试剂盒提取，A260/280=1.972，28s、18s比较亮，有少量降解，用反转录试剂盒反转录第一步，第二步降落pcr，退火温度85降到80，结果是特异性引物和内参都没有条带，求助，我想知道我可能会出错的地方是哪里呢，十分感谢

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
1楼 2019-04-22 17:30:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

墨小诔

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你解决了么。我也出现了这个问题，没有条带。求教！

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
2楼2020-09-23 08:03:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

userrrr

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
你好，请问你用的什么试剂盒？请问有推荐吗？谢谢！

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2023-09-09 20:13:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

AD_com

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
退火温度为什么这么高？引物Tm值就这么高吗？一般退火温度不要超过酶的延伸温度，就算是引物的Tm值确实在这个温度附近，你确定这个温度下酶的效率很高吗？所以要是引物的Tm值超过酶的延伸温度可以合并为2步法，其实就算是引物Tm值很高也没必要非要按照这个温度设置退火，正常甚至就行，无非特异性差点而已，你首先按照我说的建议，把退火搞到60度扩增一下看看有没有条带
赞一下 回复此楼
4楼2023-09-17 18:18:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 盖螃蟹 的主题更新
41/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭