24小时热门版块排行榜    

查看: 1521  |  回复: 9
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

树影_色彩

新虫 (正式写手)

[求助] 长DNA片段扩增问题 已有1人参与

大神有没有对于PCR扩增长DNA片段的建议?
最近在扩一个基因,设计引物分成了3段在扩增。
用的是takara公司的prime star GXL酶,尝试了TKS酶, 也换了不同来源的人cDNA. (主要也在尝试看在哪里表达有和表达量高)
但是片段1要么扩增大小不对,送测序测不出来,要么扩增不出来
片段2一直是扩增出来两条带,测序说是杂带
片段3一直未扩增出来

发自小木虫Android客户端
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kyuwook12

新虫 (正式写手)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 树影_色彩 at 2019-04-14 23:35:05
都小于3.3kb
...

那一般的gotaq酶就可以 一对引物就行了 不需要多段的

发自小木虫IOS客户端
8楼2019-04-15 01:41:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 10 个回答

Misterboy

铁虫 (正式写手)

重新设计引物吧,我最近也P不出来,试了几个酶,也不行,我觉的还是引物的事

发自小木虫IOS客户端
2楼2019-04-14 23:29:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

kyuwook12

新虫 (正式写手)

多长 我试过12kb 用的cloneHIFI酶

发自小木虫IOS客户端
3楼2019-04-14 23:31:15
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

树影_色彩

新虫 (正式写手)

片段1 3kb. 片段2 2kb. 片段3 1kb.

发自小木虫Android客户端
4楼2019-04-14 23:33:44
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 308求调剂 +8 倘若起风了呢 2026-03-05 10/500 2026-03-12 10:57 by 白云朵朵飞
[考研] 085701环境工程专硕求调剂 +7 幼稚园大班打手 2026-03-08 7/350 2026-03-12 08:34 by 学员8dgXkO
[考研] 0817化学工程319求调剂 +8 lv945 2026-03-08 10/500 2026-03-12 05:26 by wll0811
[考研] 0703化学一志愿211 总分320求调剂 +3 玛卡巴卡啊哈 2026-03-11 3/150 2026-03-11 22:25 by peike
[考研] 材料与化工(0856)304求B区调剂 +6 邱gl 2026-03-10 9/450 2026-03-11 16:37 by @飒飒飒飒
[考研] 材料调剂,307分 +12 张泳铭1 2026-03-09 13/650 2026-03-11 08:42 by 学员8dgXkO
[考研] 298求调剂 +3 Vv呀! 2026-03-10 3/150 2026-03-10 22:40 by 剑诗杜康
[考研] 调剂 +5 呵唔哦豁 2026-03-10 5/250 2026-03-10 22:00 by 28375m
[基金申请] PDF在线压缩软件 10+3 haxia 2026-03-08 4/200 2026-03-10 13:44 by lfy8008
[考研] 0703化学调剂 +7 小奶苍 2026-03-07 7/350 2026-03-10 05:17 by anny19840123
[考研] 295复试调剂 +4 简木ChuFront 2026-03-09 4/200 2026-03-09 21:49 by wangjihu
[硕博家园] 2026级硕士研究生招生/调剂 +3 知足常乐的乐 2026-03-06 5/250 2026-03-09 20:56 by 木瓜膏
[考研] 考研调剂,一志愿山东大学材料与化工,328分,政治51 +5 关你西红柿929 2026-03-08 6/300 2026-03-09 13:50 by 新篇章DFSS
[考研] 求调剂,一志愿江南大学,食品科学与工程,总分,320 +3 yyyyyukino 2026-03-07 3/150 2026-03-08 23:07 by 清风月
[考研] 调剂 +3 13853210211 2026-03-08 3/150 2026-03-08 19:34 by ms629
[基金申请] 进入个人成果库好难,一下午都没进去 +6 mi_dilee 2026-03-05 6/300 2026-03-08 11:43 by lan111
[考研] 081700学硕一志愿北京化工大学数二英一过六级有竞赛求调剂 +5 galaxary 2026-03-07 7/350 2026-03-08 04:37 by wang_dand
[考研] 070300化学求调剂292分 +3 打烊eee 2026-03-07 3/150 2026-03-07 20:04 by houyaoxu
[考研] 306求调剂 +7 Bahati 2026-03-05 7/350 2026-03-06 22:11 by 星空星月
[考研] 材料与化工354调剂 +4 Lucy-xiao 2026-03-06 7/350 2026-03-06 09:57 by hxuq8429
信息提示
请填处理意见