应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 病原/病毒 » 求肺炎克雷伯菌电击转化的实验步骤
51/1返回列表
查看: 1200  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

ptlyxiao

新虫 (正式写手)

[交流] 求肺炎克雷伯菌电击转化的实验步骤 已有2人参与

求高人指导!我从2月份开始一直做肺炎克雷伯菌感受态细菌，质粒电击转化，可就是一直转不进去，焦虑憔悴！求哪位高人有做过的能分享一下如何做的？谢谢！

发自小木虫Android客户端
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2019-04-10 08:23:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

肥猫p

木虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我去年做过一些KP的电转化，操作过程与e.coli基本相同。Kp电转感受态制备大致为：摇OD至0.5左右，冰浴15min，用冰10%甘油洗涤2遍，液氮速冻后-80度冻存。
电击条件为：2.5kv, 200Ω， 25uF，2mm电转杯，bio-rad电转仪。电击后LB液体复苏1h，涂布相应抗性平板。
一般情况下，转化效率很高。

我看到你是感染专业的，是否你的KP是病人身上的临床分离菌株？有些临床分离菌株确实遗传操作较为困难。你可以换一个KP菌株试试，也许不是你电转的问题，而是那个菌株的问题。
祝实验顺利！
赞一下 回复此楼
2楼2019-05-05 19:54:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ptlyxiao

新虫 (正式写手)
谢谢🙏🌹🌹🌹！再请教一下您之前做的时候是用哪株kp？@肥猫p

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
3楼2019-05-11 11:13:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

分子-黄雁

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 肥猫p at 2019-05-05 19:54:05
我去年做过一些KP的电转化，操作过程与e.coli基本相同。Kp电转感受态制备大致为：摇OD至0.5左右，冰浴15min，用冰10%甘油洗涤2遍，液氮速冻后-80度冻存。
电击条件为：2.5kv, 200Ω， 25uF，2mm电转杯，bio-rad电转 ...

您好，我想请问您电转化时质粒的量为多少

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
4楼2019-05-14 16:59:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ptlyxiao

新虫 (正式写手)
50ul的感受态细胞加入1.0ul，2.0ul，2.5ul的质粒(8ml/L)。

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2019-05-18 13:16:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 ptlyxiao 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 268求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-14 6/300 2026-03-14 22:20 by 运气yunqi
[考研] 材料工程327求调剂 +3 xiaohe12w 2026-03-11 3/150 2026-03-14 20:20 by ms629
[考研] 复试调剂 +4 z1z2z3879 2026-03-14 5/250 2026-03-14 16:30 by JourneyLucky
[考研] 211本，11408一志愿中科院277分，曾在中科院自动化所实习 +3 Losir 2026-03-12 3/150 2026-03-14 12:11 by 热情沙漠
[考研] 0703化学求调剂，总分309分，一志愿华南师范 +4 花与叶@ 2026-03-08 4/200 2026-03-14 04:40 by JourneyLucky
[考研] 考研求调剂，工科，总分304 +5 矮子不想长高了 2026-03-08 8/400 2026-03-14 04:04 by JourneyLucky
[考研] 081700一志愿211 276 四级已过 求调剂 +3 地球绕着太阳转 2026-03-08 4/200 2026-03-14 03:44 by JourneyLucky
[考研] 一志愿哈工大材料 初试成绩323 +3 手机用户 2026-03-08 3/150 2026-03-14 03:27 by JourneyLucky
[考研] 0703求调剂 +7 jtyq001 2026-03-10 7/350 2026-03-14 01:06 by JourneyLucky
[基金申请] 有必要更换申报口吗 20+3 fannyamoy 2026-03-11 3/150 2026-03-14 00:52 by zhanghaozhu
[考研] 321求调剂 +3 CUcat 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:25 by JourneyLucky
[考研] 341求调剂 +4 番茄头--- 2026-03-10 4/200 2026-03-13 23:12 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕288分求调剂 一志愿211 +4 在家想你 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:49 by JourneyLucky
[考研] 求b区学校调剂 +3 周56 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:20 by JourneyLucky
[考研] 310求调剂 +3 【上上签】 2026-03-11 3/150 2026-03-13 16:16 by JourneyLucky
[考研] 290求调剂 +7 ADT 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:17 by JourneyLucky
[考研] 0703一志愿211 285分求调剂 +4 ly3471z 2026-03-13 4/200 2026-03-13 13:00 by JourneyLucky
[考研] 工科0856专硕化学工程269能调剂吗 +10 我想读研11 2026-03-10 10/500 2026-03-13 10:14 by Yuyi.
[考研] 333求调剂 +3 152697 2026-03-12 4/200 2026-03-13 07:08 by Iveryant
[考研] 家人们 调剂不迷路 看这里 +8 likeihood 2026-03-09 13/650 2026-03-10 08:09 by likeihood
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭