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鹤飞纤123新虫 (小有名气)
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淀粉中直链淀粉检测中遇到的问题 已有1人参与
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最近在检测淀粉中直链淀粉的含量，按照伴刀豆球蛋白方法检测，理论上直链淀粉含量应该在20%-30%，最后的结果中直链淀粉和总淀粉的吸光度接近，且有的直链淀粉的吸光度比总淀粉的吸光度还大，导致最终的直链淀粉含量在80%以上，其中有几个关键点如下： 1、葡萄糖氧化酶（GOPOD）试剂盒：保证在效期内使用，且对标准样显色。 2、伴刀豆球蛋A（Con A）：保证在效期内。用Con A试剂稀释，-20℃分装保存。 Con A试剂配制：用900ml蒸馏水溶解4.92g无水醋酸钠、17.55g氯化钠、0.05g二水氯化钙、0.07g六水氯化镁和0.07g四水氯化锰，滴加冰醋酸调节pH至6.4，用蒸馏水定容至100ml。4℃下可贮存两周。用蒸馏水将30ml浓缩的Con A溶剂稀释至100ml。使用当天制备。 3、a-葡萄糖苷酶和a-淀粉酶混合液：取200U a-葡萄糖苷酶和500U a-淀粉酶，用20ml醋酸-醋酸钠缓冲液（pH4.5）溶解。分装于离心管中-20℃保存。 4、为使吸光度值大一点，增加样品浓度，原来称取0.1g，改为0.2g，结果还是不理想（吸光度稍微上升一点，但直链淀粉和总淀粉的吸光度还是很接近）。 请各位专业人士，给予帮助，如能找到关键点做出结果，本人非常感谢。 |
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鹤飞纤1232楼2019-04-22 02:49:55
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