应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 干扰/敲除 » PEG介导的真菌原生质体转化子长不大 只有白白的菌丝
51/1返回列表
查看: 2436  |  回复: 4
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

qibowen123

新虫 (小有名气)

[求助] PEG介导的真菌原生质体转化子长不大 只有白白的菌丝 已有1人参与

最近在做米曲霉原生质体转化，用的是双层缺陷培养基，质粒带精氨酸合成基因。理论上，导入后可以在缺陷培养基上生长。

问题是，PEG转化后，上层培养基能长出细小的白色菌丝，且生长到一定程度就不长了。 挑出接到丰富培养基可以继续长，在接回 缺陷培养基上就不长了。这正常吗？

真菌转化系统的阳性转化子到底应该怎么筛选，阳性转化子应该长什么样啊（我从来没见过T.T）

卡在这个问题上3个月了，求大神帮忙
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2019-04-08 10:40:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

france5885

新虫 (初入文坛)
请教一下楼主，你配制的PEG-氯化钙是澄清的还是混浊的？我配制的PEG4000是澄清的，加入氯化钙后就混浊了，这是正常的吗？
赞一下 回复此楼
2楼2019-11-07 09:52:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

ERIC20081938

铁杆木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

请问你的米曲霉菌种是什么菌种？还有所用的质粒是那个质粒呢？
赞一下 回复此楼
Flytothesky```
3楼2020-06-04 11:36:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

向文非的师妹

新虫 (小有名气)
请问楼主，你的问题解决了吗？我最近也在做米曲霉转化，跟你遇到的问题类似，平板培养第二天就长出了小菌丝菌落，菌落长不大，因为空白对照（未转质粒）也长了相同的菌丝菌落，所以这种情况应该是假阳性，为什么出现假阳性，猜测一种原因是原生质体过滤的时候有未酶解完全的短小菌丝混进去，另外可能米曲霉出现了缺陷性状丢失（恢复了精氨酸合成功能），但是如果长不大的话，后面一种可能性不大。总之，能够成片生长的才可能是真阳性，长不大的是假阳性。不知楼主后面的实验怎么样？希望能交流一下
赞一下 回复此楼
4楼2023-04-06 15:04:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

光麟之光

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 向文非的师妹 at 2023-04-06 15:04:10
请问楼主，你的问题解决了吗？我最近也在做米曲霉转化，跟你遇到的问题类似，平板培养第二天就长出了小菌丝菌落，菌落长不大，因为空白对照（未转质粒）也长了相同的菌丝菌落，所以这种情况应该是假阳性，为什么出现 ...

你好，方便交流一下吗，我最近也在做米曲霉的表达

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
5楼2023-06-15 23:27:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qibowen123 的主题更新
51/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 10/500 2026-09-02 11:35 by 大不刘6
[基金申请] 要骂人了，新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西，结果有个评委还在说凝练得不够 +8 瞬息宇宙 2026-08-31 15/750 2026-09-02 11:13 by ma0526
[基金申请] 我不理解！ +18 Edward_pc 2026-08-26 26/1300 2026-09-02 11:01 by shanzhipu
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题，而不是去凝练问题 +4 瞬息宇宙 2026-09-01 8/400 2026-09-02 10:35 by 瞬息宇宙
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 面上函评意见出来了，像什么等级？ 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高，自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[论文投稿] 小白求助 投论文要求的highlights应该如何写 5+3 l1963982152 2026-08-29 4/200 2026-09-01 09:04 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见（F口面上） +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 国社科又开始会评了，不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 基金未中，这种答复是模板吗？ +6 zhaosm1982 2026-08-27 7/350 2026-08-31 21:18 by qdxxmc
[基金申请] 面上意见出来了 +12 黄鸟于飞Chao 2026-08-29 23/1150 2026-08-31 18:57 by 黄鸟于飞Chao
[基金申请] 能否申诉？ +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 基金不中，共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[基金申请] 为什么到现在没收到通知？ +5 tannykie 2026-08-29 5/250 2026-08-30 21:05 by purplejack
[基金申请] 有没有仍没收到信息的 +7 德尚中行 2026-08-27 8/400 2026-08-30 20:52 by purplejack
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已，这评审意见是按照杰青的条件评的吧？ +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭