| 查看: 307 | 回复: 2 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
[交流]
我所总结的AFLP分子标记的要点
|
|||
|
现在仍然有很多实验室在做AFLP分子标记，但可能会遇到一些问题，主要是重复性不好，有时候能够扩出来，有时候扩不出来，再有就是跑聚丙烯的时候差异带可能是700bp，但回收后就变成了200多，也就是在聚丙烯板上看到的和回收的片段不一样打，对于这几个问题，现总结如下，希望对大家有所帮助，同时也希望同行们不吝赐教。 第一，所提取的基因组DNA必须保持完整，不断裂，还要经过纯化，除去蛋白，多糖，酚类及RNA等杂质，否则影响酶切效果。 第二，尽量用大公司生产的内切酶。 第三，接头让公司直接合成，尽量不要合成单链自己退火结合，大一点的公司如宝生物就能合成双链接头，只是稍贵了一点。 第四，如果跑非变性胶的话，直接点marker就行了，要是跑变性胶，扩增产物变性的同时，marker也要变性。 第五，要把每一次跑板都当成是能够跑出差异片段来做，尽最大努力做好每一天的实验。 如有不周之处，敬请指教！ |
回复此楼» 猜你喜欢
什么是人一生最重要的？
已经有6人回复
-
为什么中国大学工科教授们水了那么多所谓的顶会顶刊，但还是做不出宇树机器人？
已经有11人回复
-
网上报道青年教师午睡中猝死、熬夜猝死的越来越多，主要哪些原因引起的？
已经有9人回复
-
【博士招生】太原理工大学2026化工博士
已经有5人回复
-
280求调剂
已经有3人回复
-
面上可以超过30页吧？
已经有11人回复
-
版面费该交吗
已经有15人回复
-
体制内长辈说体制内绝大部分一辈子在底层，如同你们一样大部分普通教师忙且收入低
已经有18人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
zhuimengren639
荣誉版主 (文坛精英)
阿弥陀佛
- 应助: 6 (幼儿园)
- 贵宾: 5.655
- 金币: 100471
- 散金: 47599
- 红花: 223
- 沙发: 470
- 帖子: 32470
- 在线: 3594.7小时
- 虫号: 543637
- 注册: 2008-04-11
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
- 管辖: 论文投稿
2楼2009-05-16 14:30:39
疯狂修行者
木虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 3121.2
- 散金: 753
- 红花: 8
- 帖子: 721
- 在线: 111.2小时
- 虫号: 332393
- 注册: 2007-03-26
- 性别: GG
- 专业: 农业昆虫学
3楼2009-10-09 22:32:02