| 查看: 335 | 回复: 2 | |||
| 当前主题已经存档。 | |||
[交流]
我所总结的AFLP分子标记的要点
|
|||
|
现在仍然有很多实验室在做AFLP分子标记，但可能会遇到一些问题，主要是重复性不好，有时候能够扩出来，有时候扩不出来，再有就是跑聚丙烯的时候差异带可能是700bp，但回收后就变成了200多，也就是在聚丙烯板上看到的和回收的片段不一样打，对于这几个问题，现总结如下，希望对大家有所帮助，同时也希望同行们不吝赐教。 第一，所提取的基因组DNA必须保持完整，不断裂，还要经过纯化，除去蛋白，多糖，酚类及RNA等杂质，否则影响酶切效果。 第二，尽量用大公司生产的内切酶。 第三，接头让公司直接合成，尽量不要合成单链自己退火结合，大一点的公司如宝生物就能合成双链接头，只是稍贵了一点。 第四，如果跑非变性胶的话，直接点marker就行了，要是跑变性胶，扩增产物变性的同时，marker也要变性。 第五，要把每一次跑板都当成是能够跑出差异片段来做，尽最大努力做好每一天的实验。 如有不周之处，敬请指教！ |
回复此楼» 猜你喜欢
售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有3人回复
-
关于Filecode分析方法
已经有13人回复
-
时间戳又变了8-15
已经有9人回复
-
售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有8人回复
-
欢迎发来filecode的Mz6后的代码验证其规律
已经有52人回复
-
售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急
已经有5人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有9人回复
-
哪位老哥知道今年的国自然具体哪一天放榜？
已经有6人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急
已经有6人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
zhuimengren639
荣誉版主 (文坛精英)
阿弥陀佛
- 应助: 6 (幼儿园)
- 贵宾: 5.655
- 金币: 99424.2
- 散金: 47599
- 红花: 223
- 沙发: 470
- 帖子: 32491
- 在线: 3600.1小时
- 虫号: 543637
- 注册: 2008-04-11
- 性别: GG
- 专业: 有机合成
- 管辖: 论文投稿
2楼2009-05-16 14:30:39
疯狂修行者
木虫 (正式写手)
- BioEPI: 1
- 应助: 6 (幼儿园)
- 金币: 3121.2
- 散金: 753
- 红花: 8
- 帖子: 721
- 在线: 111.2小时
- 虫号: 332393
- 注册: 2007-03-26
- 性别: GG
- 专业: 农业昆虫学
3楼2009-10-09 22:32:02
