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病毒转染HEPG2 细胞
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| 最近我在用病毒载体做knockdown转染, 转染的细胞是HepG2. 首先,我用的是pLKO.1-TRC cloning vector. 然后用六孔板种上HepG2, 用不同的浓度puromycin去筛选细胞,得到致死所有细胞的最小浓度是3mg/ml. 于是开始转染。但是开始出现问题了,1)转然24小时后,细胞貌似比以前长得快多了,然后用puromycin去筛选,六天了死的很少,细胞在六孔板里都长满了,只好分开重新种,又用5mg/ml puromycin 去筛选,还是死的少,不久有长满了。Western Blotting 显示 没怎么敲掉,条带几乎一样粗。 |
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5楼2019-04-03 16:28:40
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2019-04-03 10:57
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youngen3楼
2019-04-03 15:02
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2019-04-06 17:03
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2019-04-08 08:53
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