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admeng2004金虫 (正式写手)
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[求助]
关于GFP转染后细胞动态迁移拍摄的问题
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求助各路大神。我们将人脐带静脉内皮细胞（huvecs）接种在准备好的静电纺纤维膜上，希望在共聚焦显微镜下观察其在材料表面的迁移行为。为了使迁移过程可视化，我们先对培养在孔板板底的细胞用egfp质粒进行了转染并将其接种在材料表面，接种后放到共聚焦显微镜下观察。 蔡司lsm880，time series/tile scan 下调整pinhole ,master gain值等各项参数，但是在调试过程中（不超过1h），便发现视野下的荧光强度越来越弱，甚至到后来显微镜下已经捕捉不到其信号。我们曾尝试了适当增加转染质粒浓度，降低激光强度，降低拍摄频率等多种方式，然而问题依旧没有得到解决  期待大神解救····· |
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